OCT在腫瘤疾病中的應(yīng)用:基于新型光學(xué)技術(shù)監(jiān)測(cè)組織與細(xì)胞形態(tài)
提起腫瘤或者癌癥,人們無(wú)不談虎色變。腫瘤疾病高度惡性,高死亡率。雖然醫(yī)務(wù)與科研工作者基于生理,病理和免疫水平不斷在腫瘤的治療手段上攻克諸多難題,但不同器官來(lái)源以及不同病因引發(fā)的腫瘤在臨床診斷與治療中依舊顯得“道高一尺,魔高一丈”。以肝癌為例,由于缺乏早期典型的臨床癥狀,患者大多在疾病初期無(wú)法察覺體內(nèi)異常,一旦患者出現(xiàn)腹脹,黃疸等消化系或者全身癥狀時(shí),往往肝癌已經(jīng)進(jìn)入中晚期,相應(yīng)的也就錯(cuò)過了最佳治療時(shí)期,患者不但面臨巨大身體痛苦,同時(shí)經(jīng)濟(jì)與精神壓力也接踵而至。對(duì)于腫瘤疾病而言,早期、精確的發(fā)現(xiàn)病灶,在疾病初期及時(shí)對(duì)腫瘤級(jí)別,分化程度進(jìn)行評(píng)估,在接受手術(shù)或者化學(xué)藥物治療后能夠準(zhǔn)確的評(píng)估病灶部位消減情況對(duì)于該類疾病預(yù)防與治療意義重大。
光學(xué)相干斷層掃描技術(shù)(Optical Coherence Tomography,簡(jiǎn)稱OCT)是一種基于光學(xué)原理的非侵入性、無(wú)接觸的顯微成像技術(shù)。OCT通過測(cè)量光在樣品中反射或散射的強(qiáng)度和時(shí)間延遲信息,可以獲得高分辨率、高對(duì)比度的斷層結(jié)構(gòu)圖像,OCT 技術(shù)可以在不影響組織結(jié)構(gòu)的情況下,對(duì)人體組織進(jìn)行成像,該技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于既減少了傳統(tǒng)放射性檢查對(duì)人體造成的潛在傷害,又消除了人們對(duì)侵入性檢查產(chǎn)生的恐懼心理。目前OCT已經(jīng)作為一項(xiàng)成熟的技術(shù)被應(yīng)用黃斑區(qū)病變,青光眼,視網(wǎng)膜血管病變等眼科疾病的診療中。在癌癥領(lǐng)域,同樣有很多科研團(tuán)隊(duì)在不斷探索OCT的應(yīng)用前景,并且在諸多期刊中展示了學(xué)術(shù)成果。
由于OCT能夠產(chǎn)生高分辨率的組織斷層影像,越來(lái)越多的醫(yī)學(xué)科研人員開始關(guān)注OCT技術(shù)在疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值,尤以腫瘤疾病更為突出。2009年紐約石溪大學(xué)生物工程系團(tuán)隊(duì)對(duì)OCT組織層次分辨能力進(jìn)行了測(cè)試,他們利用高分辨率OCT分別掃描了健康小鼠膀胱和尿路移行細(xì)胞癌的組織,通過與HE染色結(jié)果對(duì)比發(fā)現(xiàn),OCT掃描結(jié)果能夠清晰的區(qū)分健康膀胱尿路上皮,固有層以及肌層組織。通過增強(qiáng)局部細(xì)胞運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的相位亂序,OCT成像能夠精確的甄別健康尿路上皮組織與惡變的細(xì)胞核形態(tài)差異。在OCT影像中能夠明顯的看到,惡變的尿路上皮細(xì)胞核暗區(qū)對(duì)比度更為明顯,并且細(xì)胞核體積更大。同時(shí)相較于健康組織,OCT能夠觀察到清晰的組織形態(tài)改變以及浸潤(rùn)深度。該團(tuán)隊(duì)認(rèn)為OCT的這一功能有望成為腫瘤疾病內(nèi)鏡下組織光學(xué)活檢的重要手段。
同樣,在腫瘤與健康組織鑒別方面,2021年伊利諾伊大學(xué)團(tuán)隊(duì)對(duì)手術(shù)切除狗乳腺組織進(jìn)行了OCT掃描,并同時(shí)將掃描結(jié)果與HE 染色切片進(jìn)行對(duì)比。與膀胱不同的是,乳腺組織構(gòu)成更為復(fù)雜,除共有的皮膚及皮下組織外,乳腺富含腺體以及一定量的脂肪組織。這便要求OCT在成像時(shí)能夠在同一水平面同時(shí)區(qū)分更多的組織層次和類型。該團(tuán)隊(duì)沒有對(duì)OCT成像數(shù)據(jù)進(jìn)行高分辨處理,在常規(guī)參數(shù)水平下,能夠看到脂肪組織整體呈低散射性,偶見單個(gè)脂肪細(xì)胞呈高散射(白色)輪廓,形成蜂窩狀外觀(圖A.D).乳腺組織呈中高散射,具有可辨別的組織結(jié)構(gòu),小葉組織結(jié)構(gòu)和高細(xì)胞密度清晰可見(圖B.E)。相比之下,乳腺腫瘤表現(xiàn)出高散射和更高的組織致密性,組織外觀雜亂無(wú)章(圖C.F)。
OCT除應(yīng)用于觀察組織形態(tài)外,2022年阿德萊德大學(xué)醫(yī)學(xué)科學(xué)學(xué)院的科研團(tuán)隊(duì)利用它莫西芬對(duì)不同類型的乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,該課題以OCT影像技術(shù)能夠區(qū)分經(jīng)特異標(biāo)記后的ER(+)與ER(-)乳腺癌細(xì)胞為假設(shè),通過將共聚焦顯微鏡技術(shù)與OCT融合,得出結(jié)論OCT可以準(zhǔn)確區(qū)分ER(+/-)乳腺癌細(xì)胞群。團(tuán)隊(duì)成員利用抗雌激素藥物它莫西芬與雌激素受體(ER)特異性結(jié)合這一特性,針對(duì)ER設(shè)計(jì)了一組綠色熒光探針,通過體外將探針與ER(+)細(xì)胞MCF7以及ER(-)細(xì)胞MDA-MB-231進(jìn)行共孵育后,對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行了OCT以及共聚焦掃描。在細(xì)胞密度方面,OCT鏡下能夠看到它莫西芬對(duì)MCF7表現(xiàn)出更顯著的抑制效應(yīng),并且通過共聚焦圖像合并,OCT觀察到的細(xì)胞團(tuán)位置與綠色熒光標(biāo)記的ER細(xì)胞相對(duì)應(yīng)。
OCT直接觀察器官形態(tài)改變
除泌尿系腫瘤與乳腺癌外,許多學(xué)者應(yīng)用OCT在其他腫瘤疾病中也進(jìn)行諸多研究,包括腫瘤體積測(cè)量,手術(shù)邊緣評(píng)估,甚至OCT技術(shù)可以在良惡性腫瘤的鑒別方便提供數(shù)據(jù)支持。作為一種正在應(yīng)用于新領(lǐng)域的成熟成像方法,OCT的優(yōu)勢(shì)。首先,OCT可以提供非侵入性,高質(zhì)量的詳細(xì)圖像。通過光學(xué)、電學(xué)和圖像處理,OCT可以提供微米級(jí)分辨率的組織圖像,以及高分辨率的3D成像,可用于疾病的早期診斷和治療。另外,OCT可以在解剖結(jié)構(gòu)方面對(duì)軟組織進(jìn)行對(duì)比,便于對(duì)軟組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行詳細(xì)分析,對(duì)癌癥的早期診斷具有重要意義。此外,OCT可以集成到小探頭和導(dǎo)管中,使其適合進(jìn)入內(nèi)臟進(jìn)行癌癥成像和診斷。由于OCT本身的穿透深度和視野有限,腫瘤學(xué)家很難從小面積組織的圖像中進(jìn)行判斷。此外,在評(píng)估術(shù)中腫瘤邊緣時(shí)成像深度有限,通常在2mm以內(nèi),這極大地限制了其在手術(shù)中的應(yīng)用。而且,使用小探頭和導(dǎo)管成像時(shí),很難很好地固定探頭或成像模塊,因此很難獲得清晰的圖像。因此,OCT未來(lái)發(fā)展的第一步是提高成像深度,并結(jié)合人工智能算法和多種成像方法,使其能夠在相對(duì)較大的深度和視野下進(jìn)行成像。其次,在OCT本身超高采樣速度和高分辨率的優(yōu)勢(shì)下,未來(lái)OCT有望采用多幀合成技術(shù)來(lái)提高采樣的穩(wěn)定性;最后,OCT技術(shù)應(yīng)進(jìn)一步與其他學(xué)科和技術(shù)融合,如人工智能、醫(yī)學(xué)圖像分析、智能機(jī)械制造、安全環(huán)保的新材料工藝等。它不僅可以用于疾病早期診斷和促進(jìn)科學(xué)研究,為成像測(cè)量提供更客觀、精確的依據(jù),還可以為疾病的常規(guī)檢測(cè)提供更安全、更快捷、更便宜的技術(shù)解決方案。
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