電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的步驟
電化學(xué)發(fā)光反應(yīng):電化學(xué)發(fā)光(electro-chemiluminescence,ECL)是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng),實(shí)際上包括了電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個過程?;瘜W(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕[Ru(bpy)3]2和電子供體三丙胺(TPA)在陽電極表面同時(shí)各失去一個電子發(fā)生氧化反應(yīng)。二價(jià)的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三價(jià),后者是一種強(qiáng)氧化劑。TPA被氧化成陽離子自由基TPA+*,后者很不穩(wěn)定,自發(fā)地失去一個質(zhì)子(H+),形成自由基TPA*,這是一種非常強(qiáng)的還原劑。這兩個高反應(yīng)基團(tuán)在電極表面迅速反應(yīng),三價(jià)的[Ru(bpy)3]3+被還原形成激發(fā)態(tài)的二價(jià)[Ru(bpy)3]2+*,能量來源于[Ru(bpy)3]3+和TPA*之間存在的高電化學(xué)電位差。TPA*自身被氧化成二丙胺和丙醛。接著激發(fā)態(tài)的 [Ru(bpy)3]2+*衰減成基態(tài)的[Ru(bpy)3]2+,同時(shí)發(fā)射一個波長620nm的光子。這一過程在電極表面周而復(fù)始地進(jìn)行,產(chǎn)生許多光子,使光信號得以增強(qiáng)。
電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的步驟:
(1)將試管內(nèi)兩步反應(yīng)結(jié)束的反應(yīng)液輸入流動池,由于磁鐵吸引,磁性微粒被吸著在電極上,其余反應(yīng)物流出流動池,完成游離的和結(jié)合的標(biāo)記抗體的分離。
(2)將TPA溶液送入流動池,將殘余的游離標(biāo)記抗體排出流動池,在流動池中充滿TPA溶液。
(3)撤下磁鐵,電極上通電,三聯(lián)吡啶釕與TPA發(fā)生電化學(xué)發(fā)光反應(yīng),發(fā)出的光被光電倍增管收集,測定光強(qiáng)度。
(4)通過換算得出待測標(biāo)本中的抗原濃度。
(5)在流動池中送入清洗液,將反應(yīng)物沖洗,即可測定下一個標(biāo)本。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。