高效液相色譜儀也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等,它是在經(jīng)典液相色譜法的基礎上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。
高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。由以下幾個部分構成:
1.溶劑輸送系統(tǒng)
儲液器:用來貯存數(shù)量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器,以防止流動相中的顆粒進入泵內。
脫氣器:脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內流出時釋放出氣泡進入檢測器,從而引起噪聲,不能正常檢測。
輸液泵:將儲液器中的流動相連續(xù)不斷地以高壓形式進入液路系統(tǒng),使樣品在色譜柱中完成分離過程。
梯度洗脫裝置:是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。
2.進樣系統(tǒng)
進樣器:是將樣品送入色譜柱的裝置,進樣方式可以分為兩種:閥進樣或自動進樣。比較常用的是采用自動進樣器裝樣。
3.分離系統(tǒng)
色譜柱:對樣品進行分離,是整個色譜系統(tǒng)的心臟,它的質量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。
4.檢測系統(tǒng)
檢測器:將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉變成易于測量的電信號,被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收,得到樣品分離的色譜圖。
5.數(shù)據(jù)處理和記錄系統(tǒng)
對色譜數(shù)據(jù)進行處理,并參與HPLC儀器的自動控制。
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