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液相色譜柱放了很長時(shí)間即使密封良好，柱內(nèi)的流動(dòng)相還是會(huì)揮發(fā)掉一些。這時(shí)如果流動(dòng)相流速上升得很快，就極易將色譜柱的柱床破壞，那怎么辦呢？
合理的操作是，一開始流動(dòng)相用較小的流速0.1～0.2mL/mn(對(duì)4.6mm內(nèi)徑的標(biāo)準(zhǔn)分析柱)，仔細(xì)觀察色譜柱出口(先不接管路)流動(dòng)相流出的情況以及柱壓的變化。如果色譜柱沒全部干，很快會(huì)有帶氣泡的流動(dòng)相流出，等流出流動(dòng)相中沒有氣泡，壓力上升后，可逐步提高流速，使流動(dòng)相充分浸潤柱床。
如果柱子里流動(dòng)相基本干了一年以上，如果溶劑揮發(fā)性強(qiáng)，密封不好，時(shí)間可能更短)，最好用更低的流速，讓流動(dòng)相緩慢通過色譜柱，并將氣泡排除，這至少需幾個(gè)小時(shí)，有條件的沖洗幾天，也可放置幾天使流動(dòng)相充分浸潤色譜柱的柱，切不可操之過急。
作為HPLC分析人員，當(dāng)色譜柱拆下不用時(shí)，一定要把堵頭擰緊，使色譜柱兩頭密封。還應(yīng)當(dāng)注意定期檢査長期不用的色譜柱，避免讓柱床干了。
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