如何選擇合適的內(nèi)參抗體?
Tips:在選擇內(nèi)參抗體時,我們需要遵循幾個原則:
1.種屬來源
哺乳動物的樣本需要選擇哺乳動物中穩(wěn)定表達(dá)的蛋白作為內(nèi)參,同樣的,植物樣本需要選擇植物中穩(wěn)定表達(dá)的蛋白作為內(nèi)參。
2. 細(xì)胞定位
靶標(biāo)蛋白的細(xì)胞定位不同,適合的內(nèi)參也不同。如全細(xì)胞裂解液可選擇beta-actin、beta-tubulin等,膜蛋白一般選擇Na K ATPase,核蛋白則選擇Lamin B1、Histone H3等。
3. 分子量
內(nèi)參蛋白的分子量需要與目標(biāo)蛋白的分子量有所區(qū)別,否則兩者條帶無法分開。一般目的蛋白與內(nèi)參蛋白大小至少相差5K Da以上。
4. 表達(dá)因素
內(nèi)參選擇還需要考慮實際的實驗環(huán)境。GAPDH是代謝類蛋白,在活組織中表達(dá)較穩(wěn)定。beta-actin和beta-tubulin是結(jié)構(gòu)蛋白,不同組織的細(xì)胞結(jié)構(gòu)會有差異性。
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beta-actin 小鼠單克隆抗體(1C7)
beta-actin兔多克隆抗體
GAPDH小鼠單克隆抗體
PCNA小鼠單克隆抗體(1D7)
植物actin小鼠單克隆抗體(3T3)
品牌:亞科因(Abbkine)
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