反相液相色譜法(RPLC)是應(yīng)用廣泛的色譜分離技術(shù),它能與各種常規(guī)的檢測方法結(jié)合,解決多種分析應(yīng)用問題。然而對于以下“兩性”分析物,反相液相色譜法(RPLC)無法或很少保留。
- 極性化合物
- 親水性化合物
正相液相色譜(NPLC),使用不利環(huán)保的非水溶性流動相,如己脘或環(huán)己脘來分析這些物質(zhì)。但是在這種實(shí)驗(yàn)條件下,很多極性和親水化合物往往很難溶解,從而限制了NPLC的應(yīng)用范圍。
近幾年,一些帶有極性修飾的反相色譜柱出現(xiàn),在一定程度解決了部分極性化合物的分析難題,但是此類固定相并不能從原理上真正做到對極性化合物的保留。
聰明的科學(xué)家們發(fā)現(xiàn),在HILIC色譜柱上,物質(zhì)的洗脫順序與RPLC恰恰相反。換句話說,在RPLC柱上很難保留或根本不保留的物質(zhì),在通常的實(shí)驗(yàn)條件下,在HILIC柱上有較強(qiáng)的保留。因此,對于極性化合物和親水性化合物,選用親水作用液相色譜-HILIC成為了大家常用的一種手段。
兩性離子固定相的色譜柱參數(shù)
默克公司生產(chǎn)幾種不同特色的HILIC專.利產(chǎn)品,包括ZIC-HILIC、ZIC-pHILIC和ZIC-cHILIC兩性離子固定相。
ZIC-HILIC固定相:以硅膠為基質(zhì),帶有共價鍵合的永(久性磺酸甜菜堿型兩性離子官能團(tuán)。
ZIC-HILIC有粒徑為3.5、5和10μm的填料,裝在不同尺寸的柱子中。其中毛細(xì)管柱的柱材是有玻璃內(nèi)襯的不銹鋼,分析柱的柱材質(zhì)是PEEK (polyether ether ketone)和不銹鋼,而制備柱則是不銹鋼的。
ZIC-pHILIC固定相:聚合物基質(zhì),具有相同的磺酸甜菜堿型兩性離子官能團(tuán),有5μm的聚合物填料。
ZIC-cHILIC:磷酰膽堿型兩性離子官能團(tuán)。
不同兩性離子固定相的相關(guān)應(yīng)用:
(下面幾個應(yīng)用中右邊的文字提取出來放在峰圖的下面)
ZIC-HILIC應(yīng)用實(shí)例—有機(jī)酸分析
ZIC-cHILIC應(yīng)用實(shí)例—核苷酸分析
ZIC-pHILIC應(yīng)用實(shí)例—類黃酮分析
異黃酮苷(1)、山(奈酚( 2)和紫杉葉素(3)的分離
使用ZIC-HILIC,您將收獲:
- 色譜柱更耐用,單個樣品的分析成本降低
- 直接分離極性和親水性化合物
- 更高的質(zhì)譜靈敏度和更簡單的樣品處理
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