動物實驗結束后,為了減輕動物的疼痛及痛苦,此時從人道主義的觀點出發(fā)可以對這些動物實施安樂死(Euthanasia)。實施安樂死時有一些特殊的要求需要考慮,重要的是安樂死的方法必須人道。動物實驗中,有時為了獲得動物組織器官進行研究,需要處死動物,安樂死的方法應該對動物的組織器官的研究沒有影響。另外,實施安樂死的方法還要可靠、有效、經濟、容易實施,對實驗人員必須安全。
本文對實驗動物安樂死技術、《指南》對我國實驗動物安樂死處理有什么啟發(fā)和指導作用、實驗動物安樂死涉及的福利指標、實驗動物安樂死對提升動物福利倫理作用等內容進行了詳細講解。文末附動物安樂死工作工作站購買鏈接。
從大的背景來說,當時實驗動物安樂死的理念在我國已被逐步認可,相關的法規(guī)要求和標準已逐步發(fā)布;同時因合作的進一步加強,無論是科研項目合作還是發(fā)表學術論文,實驗動物anlesi都已成為實驗動物福利倫理的關鍵問題。但實際工作中究竟該如何選擇和實施anlesi才符合國內和要求?這成為實驗動物從業(yè)人員和科研人員面臨的問題。
目前實驗動物anlesi在我國也開始得到重視,近幾年發(fā)布的多項國標均對實驗動物anlesi提出具體要求,包括《實驗動物福利倫理審查指南》(GB/T 35892-2018)、《實驗動物機構 質量和能力的通用要求》(GB/T 27416-2014)、《實驗動物福利倫理審查技術規(guī)范》(DB11/T 1734-2020)等。在實驗動物機構認可工作中,所有的機構已將實驗動物anlesi作為重點工作落實,基本可以按照動物種類、動物年齡及實驗要求等,選擇適合的方式實施anlesi。國內設備廠商也開始生產實驗動物anlesi設備包括二氧化碳anlesi儀等。實驗動物anlesi實施推進很快。
與歐美等國家相比,我國在實驗動物安樂死的研究和實施發(fā)展進程方面,仍存在一定差距。美國、英國、加拿大等國家均有專門針對實驗動物anlesi的法規(guī)要求、技術指南,對anlesi方法的實施條件、操作細節(jié)有更嚴格的規(guī)定和要求,在這方面我國還存在差距。其次,在實驗動物anlesi方法的評估、新安樂死方法的研究方面,我國還需進一步加強。該部分涉及動物痛苦水平的評估、可用于anlesi藥/物或方法的尋找及安樂死設備的研發(fā)等內容。實驗動物anlesi實施的監(jiān)督需進一步加強,包括機構內部獸醫(yī)的監(jiān)督、IACUC的監(jiān)督及實驗動物管理或認可機構的檢查。
anlesi是非常重要的動物福利指標,具體來說,實驗動物anlesi涉及的福利指標包括哪些?我國目前出臺了哪些與動物福利倫理相關的指導政策或標準?實驗動物anlesi對提升動物福利倫理水平表現在哪些方面?
實驗動物安樂死涉及的福利指標包括以下幾類:動物行為研究,包括厭惡感實驗、喜好實驗等;神經系統(tǒng)研究,包括監(jiān)測動物腦電圖(EEG)和腦皮層電圖 (ECoG);觀察動物身體反射,如強直-陣攣發(fā)作等;檢測動物生理學指標,包括動物心率、血壓和皮質醇水平等。
目前我國出臺的動物福利倫理相關的指導政策和標準有:《關于善待實驗動物的指導性意見》(國科發(fā)財字〔2006〕398號)、、《實驗動物福利倫理審查指南》(GB/T 35892-2018)、《實驗動物機構 質量和能力的通用要求》(GB/T 27416-2014)、《實驗動物福利倫理審查技術規(guī)范》(DB11/T 1734-2020)、《動物實驗人道終點評審指南》(RB/T 173-2018)、《實驗動物anlesi評審指南》(待發(fā)布)、《實驗動物運輸通用規(guī)范》(待發(fā)布)。
常用的實施安樂死的方法可分為兩大類:藥/物化學法和機械物理法
1.化學藥/物法
是指用一種藥/物或其他化合物處死動物。常用的是使用過量的全身麻醉劑,使動物心跳停止、呼吸衰竭而死亡。戊巴/比妥相對來說作用迅速、給藥簡單、價格低廉,是常用的實施anlesi選擇的藥/物,腹腔或靜脈注射過量的戊巴/比妥(100~150mg/kg)即可。巴比/妥酸鹽可致血管擴張,引起器官淤血,可能影響組織學研究。
用于安樂死的吸入麻醉劑有、氟烷、恩氟烷和異氟烷等。CO2也常被用做安樂死的吸入劑。將動物放置含有100%CO2的環(huán)境中,很多種動物就產生嚴重的呼吸困難而死亡。用這種方法處死動物時,動物意識清醒,能感受到痛苦,不是理想的方法。如果將動物放置在一定濕度、C02和O2的比例為6:4的混合氣體環(huán)境中,等動物逐漸喪失意識后,將CO2濃度升至100%,在至少保持10min以確定動物死亡,這時,動物*是在無意識狀態(tài)下死亡的,死亡需30~60min,如果時間太長,則不是優(yōu)先的方法。CO2等吸入劑能誘發(fā)動物肺水腫,可能影響其后研究中對動物組織器官的利用。
2.機械物理法
大多數的藥/物化學法存在著潛在干擾某些實驗結果的可能性,所以利用機械物理法實施anlesi可能更適合動物處死后利用某些特定的組織器官進行生物化學或組織學檢查。如果有可能,在應用機械物理法處死動物時,應盡可能使用一些鎮(zhèn)/靜劑或麻醉劑。所有的機械物理法都可能對動物造成痛苦。所以在挑選一種anlesi的方法時,應當考慮到這一點。機械物理法包括斷頭術(Decapitation)和頸椎脫臼術(Dislocation of cervical vertebra)。斷頭術和頸椎脫臼術適合于小鼠、大鼠、倉鼠、沙鼠、小狗、小貓和小鳥,并不適宜于大動物。如果機械物理法能被快速、專業(yè)地完成,就不會給動物帶來疼痛。實施機械物理法后,應給動物放血或損毀大腦,確保動物死亡。
對于新生的動物和體重小于20g的動物,可以把它們浸入液氮中迅速冷凍來實施anlesi。這種方法能否使動物快速喪失意識還受到一些人的質疑。另一種替代方法是對動物的中/樞神經系統(tǒng)進行微波照射,使動物立刻死亡,動物的組織器官生化特性不發(fā)生改變。如果使用微波,必須有相應的設備。
對于大型的實施動物,如體型較大的犬、豬、反芻動物、馬等,可以先麻醉,使其喪失意識,然后切斷其頸總動脈放血,使之立即死亡。
雖然在今天的科學技術下,我們還不得不依靠動物實驗來積累臨床經驗,但我們明白,人和地球上的所有動物和諧發(fā)展才是自然賦予地球生命的意義。讓我們對實驗動物致以無限敬意,在心中為它們默默慰問。
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