農(nóng)藥殘留速測儀測定方法
農(nóng)藥殘留速測儀產(chǎn)品描述
根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶的活性,造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累,影響正常傳導(dǎo),使昆蟲中毒死亡這一昆蟲毒理學(xué)原理,用在對農(nóng)藥殘留的檢測中。如果蔬菜的提取液中不含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥或殘留量較低,酶的活性不被抑制,試驗(yàn)中加入的底物就被酶水解,水解產(chǎn)物與加入的顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色。反之,如果蔬菜的提取液中含有一定量的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥酶的活性就被抑制或部分被抑制,試驗(yàn)中加入的底物就不能被酶水解或少部分被水解,從而不顯色或顏色變化很小,利用吸光值隨時(shí)間的變化情況計(jì)算出抑制率,就可以判斷樣品中含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留情況。
農(nóng)藥殘留速測儀測定方法
1.試劑配制
A 浸提液(緩沖液):取浸提劑(緩沖劑)一袋倒入500mL燒杯內(nèi),加蒸餾水,溶解后轉(zhuǎn)移到500mL容量瓶中定容到刻度,常溫下保存。
B 酶 液:每瓶酶中內(nèi)加入3mL蒸餾水, 搖勻即可使用。
C 底 物:每瓶底物內(nèi)加入3mL蒸餾水, 搖勻即可使用。
D 顯色劑:每瓶顯色劑內(nèi)加入10ml蒸餾水,搖勻即可使用。
注:配置后的試劑,切忌長時(shí)間在室溫下放置,用后應(yīng)立即放入冰箱0℃以下冷凍室保存。
2.樣品提取
選取有代表性的果蔬樣品,沖洗掉表面的泥土,剪成1cm左右見方碎片,取樣品2g放入樣品處理瓶中,加入10mL浸提液振蕩2-3min(有條件的用超聲波振蕩),靜置3min取上清液,上清液不清時(shí)需用濾紙過濾,濾液即為樣品處理液,備用。
3.對照溶液的制作
取1支小反應(yīng)瓶,加入浸提液2.5mL.再分別加入100uL酶液及100uL顯色劑,混勻后放置15分鐘(如果溫度低于25℃,需在37℃恒溫水浴中放置15分鐘)時(shí)間到后,馬上加入100uL底物混勻并立即倒入比色皿中放入儀器測試。
注: 吸光度應(yīng)在0.3以上,小于0.3可能試劑已失效。
使用過程中,更換新試劑、環(huán)境溫度發(fā)生明顯變化或同一瓶試劑上次對照做的時(shí)間超過4小時(shí)以上應(yīng)重新做一次對照。
4.檢測溶液的制作
取1支小反應(yīng)瓶,加入待測樣品2.5mL.再分別加入100uL酶液及100uL顯色劑,混勻后放置15分鐘(如果溫度低于25℃,需在37℃恒溫水浴中放置15分鐘)時(shí)間到后,馬上加入100uL底物混勻并立即倒入比色皿中放入儀器測試。
注:每批樣品的控制時(shí)間應(yīng)一致。
6.測試結(jié)果的判定
結(jié)果中抑制率讀數(shù)<50%表明該樣品合格。若被測樣品的抑制率讀數(shù)≥50%時(shí),則表明蔬果中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在,建議重新檢測一次;若檢測結(jié)果仍然在50%以上,需要用氣相色譜法等分析方法或送有關(guān)部門作進(jìn)一步定量檢測。
(本儀器所配試劑依據(jù)國標(biāo)GB/T5009.199-2003的判斷標(biāo)準(zhǔn),若所選試劑依據(jù)NY/Y448-2001時(shí),需將抑制率判斷標(biāo)準(zhǔn)改為70%。)
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