精液主要由精漿組成。睪丸曲細(xì)精管內(nèi)的生精細(xì)胞在垂體前葉促性腺激素的作用下，經(jīng)精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞及精子細(xì)胞幾個(gè)階段的分化演變，后發(fā)育為成熟的精子，此過程約需70天，70%的精子貯存于附睪內(nèi)，2%于輸精管內(nèi)，其余儲(chǔ)契于輸精管的壺腹腔部，精囊僅存少量。精子隨精漿一起經(jīng)輸精管、尿道排出體外。精漿由精囊液、前列腺液以及睪丸、附睪、

    輸精管、尿道旁腺、尿道球腺分泌的少量液體混合而成。

    精液中水約占90%，固體成分約占10%，有形成分除精子外，尚含少量白細(xì)胞和生殖道脫落的上皮細(xì)胞等。精漿的化學(xué)成分十分復(fù)雜，除前面提到的成分外，還有各種精漿蛋白（白蛋白、免疫球蛋白、纖維蛋白原、α₂巨球蛋白、纖維蛋白等，總濃度為55/75g/L）、酶類（酸性磷酸酯酶、乳酸脫氫酶-X、溶菌酶等）、激素、微量金屬無素等。

    精液檢查包括精子的形態(tài)、當(dāng)選量和功能；以及精漿的生物百分比學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)及精子功能等。

    精液檢查的主要的目的有：①評(píng)價(jià)男性生育功能，為不育癥的診斷和療效觀察提供了依據(jù)；②輔助男性生殖系統(tǒng)疾病的的診斷；③輸精管結(jié)扎術(shù)后的療效觀察；④計(jì)劃生育和科研；⑤為人工授精和精子庫的篩選優(yōu)質(zhì)精子；⑥法醫(yī)學(xué)鑒定。

一、標(biāo)本采集

1．準(zhǔn)備工作①向受檢者解精液檢查的意義，標(biāo)本采集方法和注意事項(xiàng)。②標(biāo)本采集室在實(shí)驗(yàn)室附近，室溫應(yīng)控制在20-35攝氏度。室內(nèi)必須清潔、肅靜、無人為干擾；③采集標(biāo)本前禁欲3-7天。④采集精液前排凈尿液。

2．采集方法：將一次射出和全部精液直接排入潔凈、干燥的容器內(nèi)（為能用乳膠避孕套）。開始射出的精液精子濃度高。終末部分精子濃度低。采集微生物培養(yǎng)標(biāo)本須無菌操作。

3．標(biāo)本運(yùn)送：精液采集后應(yīng)立即送檢。溫度低于20攝氏度或高于40攝氏度將影響精子活動(dòng)故冬季應(yīng)注意保溫，可將標(biāo)本瓶裝入內(nèi)衣袋貼身運(yùn)送。

4．標(biāo)本采集次數(shù)：因精子生成日間變動(dòng)較大，不能僅憑一次檢查結(jié)果做診斷。一般應(yīng)間隔1-2周檢查一次。連續(xù)檢查2-3次。

二、一般性狀檢查

（一）量

    精液*液化后測(cè)定其排出量。有生育力的正常男性一次2-6毫升，平均3.5ml。一次精量與頻度呈負(fù)相關(guān)。若禁欲5-7天精量仍少于2毫升，視為精液減少；否則，稱為無精液癥（aspermia）。精漿是精子活動(dòng)的介質(zhì)，并可中和生殖道的酸性分泌物，以免影響精子活力。精液量減少（精漿不足）不利于精通過生殖道進(jìn)入子宮和輸狼管，影響受精。若一次精量超過8毫升，精子被稀釋，也不利于生育。此可因垂體前葉促性腺素的分泌功能亢進(jìn)，使雄激素的水平升高所致亦可見于禁欲時(shí)間過長者。

（二）外觀

1．顏色和透明度：正常精液呈灰白色，自行液化后為半透明的乳白色，久未采精液者可略顯淺黃色。凡精液呈鮮紅、淡紅、暗紅或醬油色并含有大量紅細(xì)胞者稱為血精，可能由于前列腺和精非特異性炎癥、生殖系結(jié)核、腫瘤或結(jié)石所致黃色或棕色膿性精液見于前列腺炎和精囊炎。

2．粘稠度：正常情況下新排出的精液迅速凝成膠胨狀，然后逐漸變化。若新排出的精液呈米湯樣，可能為先天性精囊或精囊液流出管道阻塞所致精液稀薄，粘稠度下降，也要見于精子濃度太低或無精子癥時(shí)。

（三）氣味

    正常精液具有栗花和石楠花的特殊氣味，由于前列腺液產(chǎn)生。

（四）液化時(shí)間

    精液液化時(shí)間是指新排出的精液人膠胨轉(zhuǎn)變?yōu)樽杂闪鲃?dòng)狀態(tài)所需的時(shí)間。有關(guān)精液凝固與液化的過程極其復(fù)雜，有相當(dāng)多的物質(zhì)參與，例如前列腺與精囊分泌物等都可能影響其時(shí)間長短，此外也受溫度影響。在室溫下，正常精液排出后60分鐘內(nèi)液化。前裂腺炎時(shí)，由于其功能影響，導(dǎo)致液化時(shí)間延長，甚至不液化，不液化可抑制精子活動(dòng)力，而影響生育能力。

三、化學(xué)檢查

精漿中的一些生化標(biāo)志物可反映副性腺性功能。例如檸檬酸、鋅、谷氨酰胺轉(zhuǎn)酞酶和酸性磷酸酶反映前列腺功能；果糖和前列腺素反映精囊功能；游離左旋肉毒堿、甘油磷酸膽堿和α葡萄苷酶反映附睪功能。這些特異性標(biāo)志物總排出量降低反映分泌功能低下，可用以評(píng)價(jià)男性副性腺的分泌功能。

（一）PH

精液PH測(cè)定應(yīng)在獲得精液1小時(shí)內(nèi)完成，放置時(shí)間延長，PH下降。正常精液PH為7.2-8.0。如PH<7并伴少精癥，可能是由于輸精管、精囊或附睪發(fā)育不全。

弱堿性的精液射入生殖道后可中和生殖道分泌物中的有機(jī)酸，利于精子游動(dòng)。當(dāng)PH<7或>8時(shí)均影響精子活動(dòng)。

（二）果糖

    精漿中的果糖來自精囊液，由精囊所分泌。它是精子活動(dòng)的能源。精子軸絲收縮依賴STP供給能量，而ATP可由果糖分解產(chǎn)代謝產(chǎn)生，故精漿果糖濃度減低將使精子活動(dòng)力減弱，影響受精率。在先天性精囊缺如時(shí)無果糖，精囊疾病如精囊炎時(shí)果糖下降。

[參考值] ≥13μmol/一次采集量

（三）酶類

1．酸性磷酸酶（acid phosphatase,ACP）精漿中的酸性磷酸酶幾乎全部來自前列腺，屬前列腺酸性磷酸酶。因此測(cè)定精漿中ACP有助于了解前裂腺功能和對(duì)前列腺疾病的診斷。前列腺炎時(shí)PAP活性減低；前列腺癌和前列腺肥大時(shí)，PAP活性可增高。PAP有促進(jìn)精子活動(dòng)的作用。精漿中PAP減低，精子活動(dòng)減弱，可使受精率下降。

[參考值] >200U/一次精量（β-硝基酚法）

2．乳酸脫氫酶-X（LD-X）精液中有6種乳酸脫氫酶同工酶，其中LD-X活性強(qiáng)，約相當(dāng)于LD總活性的1/3。LD-X在是存在于精母細(xì)胞、精子細(xì)胞和精子線粒體中特異酶，具有組織特異性，對(duì)精子生成、代謝、獲能、活動(dòng)能力和受精過程均有重要作用。

LD-X測(cè)定常用電泳法，但較繁瑣。1988年國內(nèi)建立了直接比色法，方法方便，易于普及。

[參考值] LD-X/LD>40%

[臨床意義] LD-x 活性和相對(duì)活性與精子濃度特別是活精子濃度呈良好的正相關(guān)，活性減低可致生育力下降。LD-X活性可作為評(píng)價(jià)男性生育功能的指標(biāo)。睪丸萎縮患者，LD-X活性降低或消失。長期服用棉酚可致精子生成障礙，甚至無精子生成，精液LD-X活性也降低或甚至消失。這說明 LD-X活性與睪丸生精功能有關(guān)，是病人睪丸生精功能的良好指標(biāo)。

3．精子頂體酶（acrosin）存在于精子項(xiàng)體內(nèi)，是一種蛋白水解酶，在受精過程中起重要作用，可用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯-醇脫氫酶（N-benzoy –L-arginine sthyl esteralcohol dehydrogenase，BAEE-ADH）法測(cè)定。

[參考值 ] BAWW-ADH法（X±s）36.72±21.43U/L

[臨床意義]在項(xiàng)體反應(yīng)中項(xiàng)體酶和其它的水解酶一起釋放，使卵細(xì)胞透明帶水解，釧使精子進(jìn)入卵細(xì)胞，完成受精過程，項(xiàng)體酶還能促進(jìn)生殖系統(tǒng)中的激肽釋放，增強(qiáng)精子活力，促進(jìn)精子運(yùn)動(dòng)，有利于受精。精子項(xiàng)體酶活性減低將致生育力下降。據(jù)報(bào)道不育組項(xiàng)體酶活性顯著低于生育組。因此可將精子項(xiàng)體酶活性作為病人精子受精能力和診斷男性不育癥的參考指標(biāo)。

（四）精漿鋅

    精漿中含多種微量元素，其中以對(duì)鋅的研究較多，精漿鋅比血義鋅濃度高，能促進(jìn)生殖器官發(fā)育，維持正常生精功能，提高精子濃度和活力。精漿鋅減低可致生殖器官發(fā)育不良、精子生成減少、死精癥等。嚴(yán)重缺陷鋅可致不育癥。精漿鋅測(cè)定可作為評(píng)價(jià)男性生育功能和診治不育癥的參考指標(biāo)之一。

[參考值] Zn(X±s)2.4μmol/一次精量

四、顯微鏡檢查

（一）涂片檢查

    精液化后充分混勻制成壓滴片，篩檢有無精子及精子能否運(yùn)動(dòng)。若未查到精子，尚須制備濃縮標(biāo)本離心法復(fù)檢。如仍查不到精子，則可判定為無精子癥；若僅見少量精子，則稱為精子缺乏；若查到的精子全部不運(yùn)動(dòng)，則可能為死精子癥，但須經(jīng)體外活體染色檢查方能確定。

    涂片檢查也是檢查輸精管結(jié)扎效果的常規(guī)方法。一般于術(shù)后經(jīng)5-6次排精，原貯于附睪和精囊內(nèi)的精子已排凈。通常于術(shù)后第六周開始檢查。每周1-2次。若連續(xù)三次查不到精子則可認(rèn)為手術(shù)成功。否則說明手術(shù)失敗。

（二）精子活動(dòng)力和存活率

1．活動(dòng)力：精子活動(dòng)力（sperm motility）是指精子向前運(yùn)動(dòng)的能力。WHO將其分為四級(jí)：*：精呈前向運(yùn)動(dòng)；b級(jí)：慢或呆滯的前向運(yùn)動(dòng)；c級(jí)：非向前運(yùn)動(dòng)；d級(jí)：不動(dòng)。

精子活動(dòng)力受溫度和保存時(shí)間的影響。精液射出后于37攝氏度條件下放置8小時(shí)，全部精子將失動(dòng)活動(dòng)力。因此必須使用液化后的新鮮標(biāo)本檢查。

活動(dòng)力正常值：排精后60分鐘內(nèi)，精子50%或更多具有前向運(yùn)動(dòng)，25%或更多具有快速前向運(yùn)動(dòng)。精子活動(dòng)力減弱或死精子過多是導(dǎo)致不育的主要原因。

2．精子存活率以“活”粗子比率表示，若不活動(dòng)的精子較多，應(yīng)時(shí)持體外活體染色檢查，以鑒別其死活?；罹拥募?xì)胞膜能阻止伊紅Y、臺(tái)盼藍(lán)等染色劑進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，故不被染色；死精子細(xì)胞膜完整性受損。失去屏障功能，可被染色成橘紅或藍(lán)色。有生育力男性伊紅染色法的活精子率≥75%。

[臨床意義]精子活動(dòng)力與受精的關(guān)系十分密切。精子活動(dòng)力低下，難以抵達(dá)輸卵管或無力與卵子結(jié)合而不能完成受精過程。A綿活動(dòng)力的精子量不足也會(huì)影響受精率。若連續(xù)檢查，精子存活率不足40%，且以c級(jí)活動(dòng)力精子為主，則可能成為男性不育的原因之一。精子活動(dòng)力下降，見于：①精索靜脈曲張，由于靜脈血回泫不暢，導(dǎo)致溫度升高及睪丸組織缺氧，使精子活動(dòng)力下降；②生殖系非特異性感染以及使用某些抗代謝藥、抗瘧藥、雌激素、氧化氮芥等時(shí)。

（三）精子數(shù)量

通過精子計(jì)數(shù)可求得精子濃度，乘以精液量還可求得一次排精排出的精子總數(shù)。正常成年男性，精子數(shù)量個(gè)體間的差異較大，精子濃度為（50-100）×10⁹/L。＜20×10⁹/L為少精子癥；正常人一次排精子總數(shù)為≥40×10⁶。精子數(shù)量減低可見于：①精索靜脈曲張；②有害金屬和放射性損害；③先天性和后天性睪丸疾病（如睪丸畸形、萎縮、結(jié)核、淋病、炎癥等）；④輸精管、精囊缺陷；⑤老年人在50歲以上者精子生成減少。

（四）精子形態(tài)?

通常用于精子形態(tài)學(xué)檢查的方法的有兩種，一種是制成新鮮濕處副縣長相差顯微鏡觀察；加一種是將精子固定、染色后用亮視野光學(xué)顯微鏡觀察。兩處方法檢查的精子形態(tài)無明顯差別，染色后精子頭可能稍有縮小。

1．正常精子形態(tài)檢測(cè)政黨精子形態(tài)的應(yīng)遵循嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)：①正常精子頭部呈橢圓形，其正常標(biāo)準(zhǔn)為頭部長度為4.0-5.5μm，寬為2.5-3.0μm，長與寬的比值為1.5-1.75項(xiàng)體區(qū)占頭部的40-70%；②必須不存在頸、中段或尾部的缺陷；③細(xì)胞質(zhì)微粒不大于正常頭部的1/3；④將所的處于邊沿異常狀態(tài)的清子均列為不正常。

2．有缺陷精子：用這種形態(tài)學(xué)分析方法考慮的精子細(xì)胞功能部位，因此認(rèn)為沒有必要常規(guī)的去區(qū)分所有頭部大小和形態(tài)之間可劃或尾部缺陷之間的變異如果大多數(shù)精子細(xì)胞中出現(xiàn)某一種部位的異常，則應(yīng)對(duì)這一普通的缺陷給予注釋。需記錄的缺陷有：

（1）頭部形狀、大小缺陷：包括大頭、小頭、錐形頭、梨頭、無定形頭、空泡樣頭（頭部大于20%區(qū)域出現(xiàn)不著色的空泡區(qū)、）雙頭或以上缺陷的聯(lián)合體。

（2）頸、中段缺陷：包括缺尾可見到游離或脫落的頭部，未附著或彎曲尾尾與頭部長軸結(jié)呈90度角，腫脹、不規(guī)則、彎曲的中段，異常薄的中段無線粒體鞘或以上任何類型缺陷的聯(lián)合體。

（3）尾部異常：包括短尾、多尾、發(fā)夾狀尾、斷尾、寬度不規(guī)則或卷尾、或尾部伴有末端微滴，或以上任何類型缺陷的聯(lián)合體。

（4）細(xì)胞質(zhì)微粒：大于正常頭部的面積的1/3。細(xì)胞質(zhì)微粒一般位于頸可中段部分，也有未成熟精子微粒沿尾部分而布在不同部位。

許多形態(tài)學(xué)的異常的精子有多種缺陷。當(dāng)多種缺陷同時(shí)存在時(shí)，只記錄一種，但應(yīng)優(yōu)先記錄頭部缺陷，其次為中段缺陷，后為尾部缺陷。每種精子缺陷的平均數(shù)目稱為畸形精子指數(shù)，是預(yù)測(cè)精子在體內(nèi)、體外功能有意義的指標(biāo)，因此形態(tài)學(xué)分析應(yīng)該是多參數(shù)原，應(yīng)分別記錄每種缺陷。異常形態(tài)見下圖。

精子形態(tài)

[臨床意義] 正常精液中正常形態(tài)的精子應(yīng)≥30%，精液中正常形態(tài)的精子減少稱畸形精子癥，與睪丸、附睪的功能異常密切相關(guān)。可見于生殖系感染。精南疆靜脈曲張、雄性激素水平異常時(shí)；某些化學(xué)藥物（如硝基唪喃妥英）、遺傳因素也可影響睪丸生精功能，導(dǎo)致畸形精子增多。

（五）未成熟的生殖細(xì)胞

    未成熟的男性生殖細(xì)胞即生精細(xì)胞，包括精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母的細(xì)胞和以育不*的精子細(xì)胞。這神經(jīng)過敏細(xì)胞胞體較大，常有1-2個(gè)核，有時(shí)易與中性粒細(xì)胞相混淆，尤其是用未染色精液鏡檢時(shí)不易識(shí)別，需在時(shí)可用過氧化物酶染色鑒別，前者為陰性，后者為陽性，正常人未成熟精細(xì)胞<1%。當(dāng)曲細(xì)精管受到藥物或其它因素的影響或損害時(shí)，精液壓中可見較多的病理型生精細(xì)胞。

五、免疫學(xué)檢查

    據(jù)WHO估測(cè)，在育齡夫婦原因不明的不育癥中，免疫性不育占約10-20%，近年來對(duì)免疫性不育機(jī)制的研究發(fā)展很快，了解到抗精子抗體是引起免疫性不育的重要原因之一。

（一）抗精子抗體

    精子的抗原性很強(qiáng)，不僅可引起的異種免疫和同種異體免疫，其器官特異性抗原尚可引起自身抗精子抗體的產(chǎn)生，精管阻塞、睪丸損傷、炎癥、附睪等副性腺感染均可使精子抗原進(jìn)入血循環(huán)或淋巴系統(tǒng)，激活免疫系統(tǒng)引起免疫應(yīng)答，產(chǎn)生身身抗精子抗體。精子出現(xiàn)包被抗體是免疫性不孕典型特征，精液中精子抗體幾乎全部為IGA、IGG、IGA的臨床意義可能更為重要，IGM在精液中極為罕見。ASAB與精子結(jié)合后可引起精子凝集、制動(dòng)；抑制精子的項(xiàng)體活性，使之難以穿透包圍卵細(xì)胞的放射冠和透明帶，阻礙精了與卵細(xì)胞結(jié)合，即使完成受精過程亦可導(dǎo)致死胎或流產(chǎn)。檢測(cè)抗精子抗體的試驗(yàn)有：

1．精子凝集試驗(yàn)（sperm agglutination test,SAT）血清、生殖道分泌物中存在的ASAB與精子膜固有抗原結(jié)合，使精子出出頭-頭、頭-尾、尾-尾的凝集現(xiàn)象。用試管玻璃片凝集法可或淺盤凝集法無凝集，或觀察10個(gè)高倍視野6個(gè)以上視野無凝集者表示生育力正常。

2．精子制動(dòng)試驗(yàn)（sperm immobilization test,SIT）ASAB與精子表面抗原相互作用激活補(bǔ)體系統(tǒng)，使精子項(xiàng)體破壞，膜通透性及完整受損，導(dǎo)致精子失去活力，正常時(shí)精子制動(dòng)值<2。

3．免疫珠試驗(yàn)：免疫珠是用兔抗人免疫球蛋白共價(jià)結(jié)合的聚丙烯酰胺微球，可同時(shí)檢測(cè)IGa 、IGG、IGM抗體。用洗滌后的精子懸液與免疫珠懸液混合后，免疫珠會(huì)粘附于表面有抗體的精子上，使用相關(guān)差顯微鏡觀察，大于等于20%的活動(dòng)精子同免疫珠粘附時(shí)為陽性，但至少有50%活動(dòng)精子被免疫珠免疫被才認(rèn)為有臨床意義。

4．混合免疫球蛋白試驗(yàn)（MAR試驗(yàn)）用混合的未加處理的新鮮精液與包被人IGG的膠乳粒混合，再向混合液中加入特異的單克隆抗人IGG血清，在膠乳粒與活動(dòng)精子之間形成混合凝集證明精子表面有IGG抗體存大。這可用為常規(guī)篩選方法。大于等于50%的活動(dòng)精子同顆粒粘附表示可能為免疫性不育；10-50%活動(dòng)精子與顆粒粘附，可疑為免疫性不育。

免疫珠試驗(yàn)與MAR試驗(yàn)兩者結(jié)果并非經(jīng)常一致免疫珠試驗(yàn)與血清精子凝集試驗(yàn)和制動(dòng)試驗(yàn)呈正相并。如這些試驗(yàn)為陽性，還應(yīng)輔經(jīng)其它試驗(yàn)以加強(qiáng)診斷的正確性。

ASAB還可用其它現(xiàn)更敏感的方法檢測(cè)如免疫酶法等，不育夫婦ASAB陽性者占25%-30%，其所針對(duì)的抗原絕大多數(shù)在精子膜上。

（二）精漿免疫抑制物質(zhì)

    人類精液含30多種抗原，但其進(jìn)入女性生殖道后通常并不引起免疫應(yīng)答，這是因?yàn)樵诰珴{中含有免疫抑制物質(zhì)（seminal plasma immunoinhibition material,SPIA）。SPIM免疫抑制效應(yīng)可能是多種物質(zhì)綜合作用的結(jié)果，其中的妊娠相關(guān)蛋白A亦稱為男性抑制物質(zhì)能抑制機(jī)體對(duì)精子的免疫反應(yīng)，保護(hù)受精卵免受排斥，以難維持正常生殖生理過程，據(jù)研究，MIM活性減低與不育癥、習(xí)慣性流產(chǎn)、配偶對(duì)丈夫精液過敏等疾病密切相關(guān)的。一但MIM減低，對(duì)自身和配偶的ASAB形成抑制作用減弱，則抗體生成率增高；加一方面對(duì)ASAB的抗精了反應(yīng)亦缺乏抑制力，故可引起上術(shù)疾病。MIM檢測(cè)對(duì)上述疾病的診斷具有重要的意義。

精漿免疫抑制物質(zhì)測(cè)定常用SPIM抗補(bǔ)體試驗(yàn)和MIM單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)。

（三）精漿免疫球蛋白測(cè)定

    正常男性精漿IGA、IGG、IGM含量分別為（90.3±57.7）mg/L (28.6±16.7)mg/L (2.3±1.9)mg/L.抗精子抗體陽性者IGM增高，生殖系炎癥者分泌型IGA增高。

六、微生物學(xué)檢查

    男性生殖道任何部位感染均可從精液是檢出微生物。迄今已人精液中檢出的微生物達(dá)30多種。包括細(xì)菌、支原體、病毒和原蟲等。常見的病在微生物有金黃色葡萄球菌、鏈球菌、淋病奈瑟菌、大腸埃希菌、類白喉?xiàng)U菌、解脲支原體等。若炎癥部位有較多的上皮細(xì)胞脫落，還可能在細(xì)胞內(nèi)查沙眼衣原體包涵體的單純皰疹病毒及巨細(xì)胞病毒包涵體等。據(jù)報(bào)道由生殖道感染所致不育癥發(fā)病率比非感染不育癥高四倍。

    精液的細(xì)菌學(xué)檢查應(yīng)在常規(guī)消毒的條件下，采集精液于無菌容器內(nèi)，常規(guī)涂片進(jìn)行革蘭氏染色或抗酸染色檢查等，亦可于37攝氏度液化30分鐘后作細(xì)菌培養(yǎng)；需氧培養(yǎng)結(jié)果>1000CFU/ml方有臨床意義。

近年來淋病奈瑟菌引起的生殖道感染有所增加，許多實(shí)驗(yàn)室開展了淋球菌快速檢查項(xiàng)目，如直接熒光抗體染色等，亦有應(yīng)用PCR技術(shù)檢查者。直接熒光抗體染色靈敏度高，但特異性差，PCR技術(shù)需嚴(yán)防污染。

七、精子功能檢查

    精子與卵結(jié)合除精子濃度和數(shù)量因素外，還必須具備妝好的運(yùn)動(dòng)功能和對(duì)宮頸粘液、卵細(xì)胞放射冠、透明帶及卵細(xì)胞膜的穿透力。精子穿透力是評(píng)價(jià)精子功能的主要指標(biāo)之一，據(jù)報(bào)告，約18%精液常規(guī)檢查正常的精子不能穿透宮頸粘液，所以檢查精子功能對(duì)研究精子在體內(nèi)運(yùn)行，受精能力發(fā)及男性不育的原因有重要價(jià)值，其常用的試驗(yàn)有：

1．體內(nèi)穿透試驗(yàn)：（in vivo penetration test）又稱性交后試驗(yàn)。檢查于排卵期性交后一定時(shí)間內(nèi)宮頸中粘液活精子數(shù)量，存活率及活運(yùn)動(dòng)力，以評(píng)價(jià)精子對(duì)宮頸粘液的穿透能力，正常人可見>50個(gè)HPF有正?；顒?dòng)能力的精子。當(dāng)宮頸粘液異?；蛴锌咕涌贵w時(shí)，精子體內(nèi)穿透能力減弱或喪失。其結(jié)果還受雌激素分泌狀況等多種因素影響。

2．體外穿透試驗(yàn)（in vitro,penetration test）

（1）簡(jiǎn)化玻片試驗(yàn)：將一滴宮頸粘液置載正玻片上，用蓋玻片鋪平，兩片之間的厚度用哇化的玻璃珠控制，在載玻片兩側(cè)各滴一滴精液，使懷蓋玻片邊緣接觸，借毛細(xì)作用將精液移向蓋玻片，使宮頸粘液與精液之間現(xiàn)一清晰接觸界面，37攝氏度卵育30分鐘。精子在接觸界面處形成一指狀突起伸入粘液，精子穿過指狀突起進(jìn)入精液，然后呈扇形散開運(yùn)動(dòng)。本試驗(yàn)的觀察指標(biāo)為：①粗精了子穿透并有90%以上具有明確直線運(yùn)動(dòng)的活動(dòng)精子時(shí)為正常結(jié)果；②精子穿透粘液，但離開粘液與沮液接觸面<500μm為較差；③精子穿透粘液，但很快失活或僅作擺動(dòng)力為異常；④精子未穿透與精液的接觸界面，精子接觸界面的精液側(cè)凝集為異常結(jié)果。

本試驗(yàn)常帶來有一定的主觀性，因?yàn)樵谄矫娌Ａ鲜咕赫骋河|界面的大小和形狀*標(biāo)準(zhǔn)化是不可能和，因?yàn)槎芏ㄐ栽u(píng)價(jià)精子粘液的相互作用。

（2）精子宮頸粘液接觸（sperm-cervical mucus contact,SCMC）試驗(yàn)：本試驗(yàn)的目的是檢驗(yàn)精液和燥頸內(nèi)是否存在損害精子運(yùn)動(dòng)功能的ASAB及其損害程度，精子與近排卵期的宮頸粘液等量混合，富強(qiáng)溫下作用30min，鏡下計(jì)數(shù)擺動(dòng)的精子，求出擺動(dòng)精子的出現(xiàn)率（%），以單獨(dú)的精液滴鏡檢作為精子活力的對(duì)照，擺動(dòng)精子的出現(xiàn)率越高，意味著精子不能穿過宮頸粘液。說吸ASAB對(duì)精子運(yùn)動(dòng)功能的損害越重，見表1。

表1 ASAB對(duì)精子運(yùn)動(dòng)功能損害

玻片試驗(yàn)與SCMC試驗(yàn)陽性者可用其它供者的精液或燥頸粘液分別進(jìn)行交叉試驗(yàn)，以利于判斷ASAB的來源是清液或燥頸粘液。

（3）無透明帶倉鼠卵-精子穿透試驗(yàn)（Zone free hamstar egg sperm penetration test,ZFHESPT）簡(jiǎn)稱精子倉鼠卵穿透試驗(yàn)是一種極為嚴(yán)格的生物學(xué)試驗(yàn)，技術(shù)復(fù)雜，影響因素多。若能加強(qiáng)質(zhì)量控制，再加上其它客觀檢查如精子活力等，可作為測(cè)定功能和基礎(chǔ)。

其方法將精子于BWW培養(yǎng)液中經(jīng)37攝氏度獲能，再與用胰蛋白酶外理去除透明帶的倉鼠混合繼續(xù)孵育完成受精過種程。然后以相差顯微鏡檢查，計(jì)數(shù)卵子受精率和受精指數(shù)。

受精率（%）=受精卵數(shù)/卵細(xì)胞總數(shù)×100%

由于卵細(xì)胞已去除透明帶一個(gè)卵細(xì)胞可被多個(gè)精子穿透。FI為穿透卵細(xì)胞的精子總數(shù)與卵細(xì)胞總數(shù)之比，從整體上反映精子穿透力與項(xiàng)體反應(yīng)。FI越高說明精子受精能力越強(qiáng)。

FI=穿透卵細(xì)胞的精子數(shù)/卵細(xì)胞總

[參考值] 受精率≥10%

[臨床意義] 精子倉鼠卵穿透試驗(yàn)可測(cè)定人精子的獲能、項(xiàng)體反應(yīng)和對(duì)卵細(xì)胞的穿透性能，綜合反映精子的受精能力，生育力正常的男性本試驗(yàn)結(jié)果正常者占82%，不育癥患者僅有2%正常，因此對(duì)不育癥的診斷有較高的應(yīng)用價(jià)值，穿透力較高的精子可選作人工授精用，成功率較高。