色譜柱在生物化學、石油化工、食品工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)保等領域應用很廣。它除了用于定量和定性分析外,還能測定樣品在固定相上的分配系數(shù)、活度系數(shù)、分子量等。下面就讓我們來了解一下色譜柱吧。
色譜柱結構
在對色譜柱進行分類之前,我們有必要來了解一下,色譜柱的結構是怎么樣的。
色譜柱由、篩板(濾片)、接頭、柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應,不銹鋼柱內壁多經過拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板,是燒結不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20μm(5~10&μm),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。
色譜柱種類
色譜柱的種類根據(jù)方法原理分為了氣相色譜柱、高效液相色譜柱這兩大類,同時還牽涉到有一些無機基質色譜填料、有機高分子類型液相色譜填料。下面主要說明一下兩大類的分類特點。
氣相色譜柱
核心是色譜柱,利用的方法是氣相色譜法,亦稱氣體色譜法、氣相層析法。氣相色譜柱主要可分為填充氣相色譜柱和毛細管氣相色譜柱。氣相色譜柱可按色譜柱的材料、形狀、柱內徑的大小和長度、固定液的化學性能等進行分類。根據(jù)固定液的化學性能,色譜柱又可分為非極性、極性與手性色譜分離柱等。
高效液相色譜柱
主要發(fā)生在色譜柱中的分離過程,均受熱力學因素和動力學因素的控制。與所有其他色譜方法一樣,色譜柱是進行液相色譜分離的核心部位。高效液相色譜柱可以按其分離模式,也可以按其分離的規(guī)模來進行分類。
若按色譜分離模式來分,大致可分為正相、反相、離子交換、疏水作用、體積排除、親和以及手性等類型。依據(jù)相間的相對極性,可以將液相色譜分為正相和應相色譜。當固定相極性大于流動相極性時,稱之為“正相”色譜;反之,當固定相極性小于流動相極性時,則稱之為“反相”色譜。
按照分離的規(guī)模及柱子的幾何參數(shù),高效液相色譜柱可以分為制備柱、分析柱和微型柱三種類型,尺寸規(guī)格也不同:①常規(guī)分析柱(常量柱),內徑2~5mm(常用4.6mm,國內有4mm和5mm),柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore,又稱細管徑柱、半微柱semi-microcolumn),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱長10~30cm;⑥生產制備柱內徑可達幾十厘米。柱內徑一般是根據(jù)柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為了避免管壁效應
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