常規(guī)儀器的使用注意事項(xiàng)和實(shí)驗(yàn)規(guī)范操作知識(shí)
實(shí)驗(yàn)規(guī)范操作知識(shí)
l 重要性:(1)出于安全考慮
(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性、可重復(fù)性
l 規(guī)范操作貫穿整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程:
①準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)。做實(shí)驗(yàn)要事先安排,要有計(jì)劃。首先要查閱文獻(xiàn),擬定實(shí)驗(yàn)方案,接下去準(zhǔn)備藥品和所用到的儀器。
注意所用藥品(提前把藥品的基本信息查詢*,包括熔沸點(diǎn),溶解性,毒性?用后如何處置等)實(shí)驗(yàn)室有無,擺放位置?這個(gè)實(shí)驗(yàn)可能要用到哪些玻璃儀器?這些玻璃儀器實(shí)驗(yàn)室是否都有?數(shù)量夠不夠?干凈不?是否要烘干?注意!提前把藥品儀器都找好,放置在一個(gè)固定的位置備用。對于一些公用實(shí)驗(yàn)儀器,要提前協(xié)商解決使用。
②實(shí)驗(yàn)過程。玻璃儀器使用前,再次檢查有無破損。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)取用藥品,開始實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過程,人不能長時(shí)間離開操作現(xiàn)場,尤其是加熱溫度高的實(shí)驗(yàn)等。注意觀察實(shí)驗(yàn)過程出現(xiàn)的現(xiàn)象,并及時(shí)做好記錄,并根據(jù)出現(xiàn)的現(xiàn)象及時(shí)調(diào)整自己的實(shí)驗(yàn)方案等。
③實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,及時(shí)處理實(shí)驗(yàn)。如確實(shí)來不及處理,要加注標(biāo)簽,以免與別人的樣品搞混淆或者被別人不小心倒掉,并在實(shí)驗(yàn)記錄本上如實(shí)寫明情況。注意實(shí)驗(yàn)臺(tái)面的整潔,玻璃儀器的清洗,及時(shí)烘干。
尤其是一些公用的儀器,不要長時(shí)間占用而不及時(shí)處理干凈或清洗。公用的藥品用后要及時(shí)歸位。
④實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析與總結(jié)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,及時(shí)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析,如遇到問題自己無法解決時(shí),可向有經(jīng)驗(yàn)的師兄師姐請教,仍不能妥善解決,及時(shí)與指導(dǎo)老師協(xié)商,規(guī)劃下一步的實(shí)驗(yàn)。定期對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行階段性總結(jié),這樣易于發(fā)現(xiàn)問題,并能總結(jié)出規(guī)律,有利于下一步實(shí)驗(yàn)。
1.超聲波使用
超聲波的功能:
加速溶解
清洗儀器
超聲脫氣脫出溶劑中的氣泡,使HPLC檢測時(shí)基線平穩(wěn)。
注意事項(xiàng):
①首先要檢查瓶子是否破損,瓶子在超聲波中要放置平穩(wěn),免得液體傾出。
②超聲波水深要合適,不宜長時(shí)間使用,注意中間的停止。
③水的定期更換。
2.恒溫水浴的使用:
①加熱水浴的水要蓋過物料
②瓶子要與冷凝管相匹配
③冷凝水的問題:水流合適,橡皮管的牢固,檢查是否有老化?大小可匹配?是否接錯(cuò)?
④下水管的放置,注意一定要放到水槽中,zui后對準(zhǔn)下水管口。一定要放穩(wěn),不要讓水漏到地板上,切忌!
3.旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀
(濃縮):主要用于在減壓條件下連續(xù)蒸餾大量易揮發(fā)性溶劑。須與循環(huán)水泵(右圖)相連接
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀和循環(huán)水泵的各個(gè)接口的磨合,注意潤滑和密封,真空管定期檢查與更換,否則真空達(dá)不到要求。
如真空抽不上來或真空度變小需檢查:
(1) 各接頭,接口是否密封
(2) 密封圈,密封面是否磨損太嚴(yán)重,還是否有效
(3) 主軸與密封圈之間真空脂是否涂好
(4) 真空泵及其皮管是否漏氣
(5) 玻璃件是否有裂縫、碎裂、損壞的現(xiàn)象
濃縮過程需要注意以下問題:
①不要裝太多,要求不超過1/2,否則易暴沸,污染。
②剛開始不要轉(zhuǎn)太快,否則真空達(dá)不到瓶子易脫落。
③濃縮過程一般先抽真空再升溫,并注意及時(shí)放氣,減少暴沸。酒精與水混合液在濃縮時(shí)特別容易暴沸
④濃縮完成關(guān)泵時(shí),注意先卸真空,再關(guān)閉水泵的電源,切忌順序顛倒造成倒吸。在卸真空時(shí)注意保護(hù)瓶子(尤其是大的,重的瓶子)不要掉入水中。循環(huán)水泵一般有兩個(gè)抽氣口,所以關(guān)泵時(shí)要觀察另一抽氣口是否在使用?卸去瓶子時(shí)也要注意水浴高度,不合適時(shí)要先降低水位,否則瓶口蘸水或者瓶子與水浴鍋碰撞,損壞玻璃瓶污染樣品。
⑤注意水浴鍋中水的更換以及循環(huán)水泵的水更換。循環(huán)水泵的水建議每周更換一次,使用頻率高時(shí)更換水的周期也要變短?;蛘邔⒗淠隹谂c循環(huán)水泵連接,實(shí)現(xiàn)循環(huán)水泵中水的適時(shí)更換。
4. 抽濾裝置的使用:與循環(huán)水泵連接
HPLC所用溶劑的過濾與脫氣:過濾除去一些顆粒狀的雜質(zhì),使用微孔濾膜,孔徑0.45um和0.22um,分為水相膜和油相膜。
減壓抽濾溶劑注意事項(xiàng)?抽濾瓶,先檢查一下可有破損?對齊才不會(huì)漏液?不能倒吸?嚴(yán)禁抽濾溶劑時(shí)操作者長時(shí)間離開工作現(xiàn)場,使得真空泵長時(shí)間空抽,減短其壽命。
5.電子天平的使用
①精密儀器,到小數(shù)點(diǎn)后三位(左圖,上海良平)或四五位(右圖,梅特勒)。已調(diào)水平,嚴(yán)禁隨意搬動(dòng)。
②注意天平的量程。一般天平上都有一個(gè)max, min。
③注意清潔。固體樣品用稱量紙,注意不要灑到稱量盤上,尤其是一些具有腐蝕性的樣品,稱取時(shí)尤其得小心。若要灑落,關(guān)閉天平電源,輕輕取出托盤,用軟紙及時(shí)將灑落到縫隙的物品清理掉,必要時(shí)用棉球蘸無水乙醇擦拭。液體樣品稱取時(shí)尤其要注意,一定不要灑到托盤、開關(guān)門的縫隙處或液晶顯示屏上。如果腐蝕,會(huì)造成天平稱量不準(zhǔn)確,門關(guān)不上或者開關(guān)門時(shí)很困難。天平使用一段時(shí)間后,要用隨機(jī)帶的校準(zhǔn)砝碼進(jìn)行校正,以保證稱量準(zhǔn)確。
④用完后及時(shí)清理。這個(gè)清理工作包括廢棄的稱量紙、天平周圍灑落物的處理、藥勺上剩余物品的清理。必要時(shí)要將藥勺清洗,無機(jī)鹽類用水沖洗基本就可以,有機(jī)藥品用相應(yīng)的有機(jī)溶劑洗滌,藥勺及時(shí)洗干凈,放回原來的位置。
6. 烘箱使用
烘樣品:①注意溫度的設(shè)定,對于所烘樣品有特殊要求的,易高溫變質(zhì)的樣品,必須等烘箱溫度穩(wěn)定后再放入。否則在烘箱升溫時(shí),會(huì)有部分時(shí)間超過設(shè)定溫度5~10度。
②盡量白天烘樣品,避免過夜。高溫烘樣品時(shí)要注意及時(shí)查看是否有異常情況。
③要用培養(yǎng)皿或燒杯盛裝,嚴(yán)禁樣品過滿,注意放水平,尤其是一些浸膏或粘稠物。
烘儀器:①清洗干凈的玻璃儀器,先瀝干大部分水后,再送入烘箱進(jìn)行烘干。
②烘儀器時(shí)去掉橡皮筋,橡膠塞等,盡量去掉標(biāo)簽紙
③先放滿上層,再放下層。下層有干儀器時(shí),須先取出,再往上層堆放潮濕儀器,否則下層干儀器易被潮濕儀器的水珠炸裂。
7.冰箱的合理使用
用途:存放一些需低溫冷藏或冷凍的藥品或個(gè)人制作的樣品,如生物樣品等。
存放樣品注意事項(xiàng):
(1)不要隨便什么藥品或樣品都往冰箱放,(這是錯(cuò)誤的觀念:樣品存在冰箱就比室溫下更易貯存等)有必要存放時(shí)再使用。擺放整齊、平穩(wěn),切忌隨意的順手堆放,冰箱門輕開輕關(guān),否則大的震動(dòng)易門柜上存放的液體樣品傾斜或傾出,污染冰箱或他人樣品。
(2)存放樣品記得貼標(biāo)簽,注明樣品為何人的?編號及盛裝何物?尤其對于個(gè)人制作的重要樣品,務(wù)必注意標(biāo)簽紙?jiān)儆盟芰夏z帶纏繞,否則樣品反復(fù)凍融易造成標(biāo)簽脫落、字跡模糊等情況。
(3)樣品如對潮濕的水汽較敏感,注意瓶子封口處用防水膠帶仔細(xì)纏繞,使其盡量隔絕水汽等。
(4)個(gè)人樣品定期清理,及時(shí)處理掉無用樣品。對于別人樣品,未經(jīng)許可勿隨意拿出,搬動(dòng)、任意丟棄等。
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