蛋白質(zhì)藥物的定量分析貫穿于藥物的研發(fā)與生產(chǎn)全過程。傳統(tǒng)制藥的PK/PD理論,對(duì)于生物技術(shù)藥物來(lái)說同樣適用,但需要綜合生物藥物自身特點(diǎn)而變化。劑量-濃度-效應(yīng)關(guān)系和暴露-反應(yīng)關(guān)系都離不開準(zhǔn)確的定量分析。并且,蛋白質(zhì)藥物的生產(chǎn)工藝優(yōu)化,降解產(chǎn)物和雜質(zhì)分析,質(zhì)量控制等工藝過程,同樣需要準(zhǔn)確定量。因此,無(wú)論對(duì)于藥物研究工作者,還是生物制藥企業(yè)來(lái)說,建立簡(jiǎn)便快速,準(zhǔn)確的生物技術(shù)藥物定量方法是非常重要的。
島津公司液相色譜三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀系列(LCMS-8030/8040/8050),為蛋白質(zhì)藥物定量分析提供了的強(qiáng)大工具。
LCMS-8030三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀采用島津公司技術(shù),實(shí)現(xiàn)了水平的超快速性能和數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。其中,作為心臟部位的[CID碰撞室]采用了島津公司專門開發(fā)的UF Sweeper®碰撞室,消除記憶效應(yīng),即使在快速測(cè)定時(shí)也可獲得高可靠性的定性/定量數(shù)據(jù),保證痕量組份的準(zhǔn)確定量分析結(jié)果。500通道/秒的超高速M(fèi)RM測(cè)定;15,000u/sec的超快速掃描速度;15msec的超快速正負(fù)離子切換速度等的超快速質(zhì)譜性能,是與UHPLC超快速分離的組合。
LCMS-8040是性能*的三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀,秉承了UFMS(Ultra Fast Mass Spectrometer)系列產(chǎn)品的超快速特點(diǎn),適用于同時(shí)定量/定性分析。LCMS-8040可以提供的掃描速度、超快速正負(fù)極性切換和555通道/秒的MRM測(cè)定能力,同時(shí)獲得同類型儀器中高水準(zhǔn)的靈敏度。創(chuàng)新升級(jí)的離子透鏡和碰撞池設(shè)計(jì),增強(qiáng)離子聚焦,減少離子損失,更是將各種掃描模式的靈敏度全面提升。尤其是在MRM模式下,靈敏度提高5倍,充分拓展了應(yīng)用領(lǐng)域,能分析出更多復(fù)雜基質(zhì)中的痕量化合物。除此之外,UFsweeper®II碰撞室,還將可能產(chǎn)生的串?dāng)_降至低。
LCMS-8050是性能*的超快速三重四極桿液.質(zhì)聯(lián)用儀,采用高透射率離子光學(xué)系統(tǒng),待輔助加熱氣的ESI接口以及基于UFsweeper III的高CID效率,實(shí)現(xiàn)了水平的高靈敏度?;赨F switching技術(shù)的超快速正負(fù)極性切換時(shí)間僅為5ms,保持高品質(zhì)與高靈敏度的同時(shí),無(wú)損定量準(zhǔn)確度。在任何掃描速度下,都可保持譜圖品質(zhì)的超快速掃描技術(shù)UF Scanning,30,000u/sec高速掃描讓定量與定性同時(shí)實(shí)現(xiàn)。產(chǎn)品設(shè)計(jì)兼顧耐久性和操作簡(jiǎn)便性,維護(hù)簡(jiǎn)單,縮短停機(jī)時(shí)間。
島津UFMS 結(jié)合Skyline 軟件加速蛋白定量分析方法開發(fā)
島津UFMS 的特點(diǎn)就是能夠執(zhí)行超快速的MRM 分析,從而減少了分析次數(shù)。圖1 給出的例子是僅通過一針進(jìn)樣完成BSA 酶解產(chǎn)物MRM 方法開發(fā)的過程。8 分鐘內(nèi)完成總數(shù)為1710 個(gè)MRM 通道分析,盡管目標(biāo)肽段與其他高豐度肽段共同流出,但是UF-MRM 分析過程中依然成功地完成了多對(duì)MRM 通道9 個(gè)不同碰撞能量的優(yōu)化。圖2 比較了一次進(jìn)樣采用UF-MRM 技術(shù)對(duì)1710 個(gè)MRM 通道進(jìn)行CE 能量?jī)?yōu)化獲得的數(shù)據(jù)和多次進(jìn)樣采用傳統(tǒng)的延遲時(shí)間和駐留時(shí)間獲得的數(shù)據(jù)。結(jié)果表明,使用UF-MRM 技術(shù),僅使用一次進(jìn)樣(駐留時(shí)間3 ms,延遲時(shí)間1 ms)就能夠獲得理想的優(yōu)化數(shù)據(jù),在高速數(shù)據(jù)采集的過程中信號(hào)強(qiáng)度沒有任何損失。結(jié)合Skyline 的直觀性和島津LCMS-8050 的UF-MRM 的特點(diǎn),定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析的通量得到了極大的提高。
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