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方法原理：將營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、凝膠和氯化三苯基四氮唑(TTC)顯色劑等加載在試紙片，經(jīng)加樣、培養(yǎng)后，細(xì)菌菌落在測(cè)試片上顯現(xiàn)出紅色菌斑，通過(guò)計(jì)數(shù)報(bào)告結(jié)果。
檢測(cè)方法：
1.樣品處理：無(wú)菌稱(chēng)取樣品25g(或25mL)放入含有225mL無(wú)菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi)，經(jīng)充分振搖(均質(zhì))做成1:10的稀釋液。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)，用1mL滅菌吸管反復(fù)吸吹制成1:100的稀釋液。以此類(lèi)推，做出1:1000等稀釋度的稀釋液，每個(gè)稀釋度更換一支滅菌吸管。
2.接種：一般食品選2～3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，含菌量少的液體樣品(如食用純水和礦泉水等)可直接用原液檢測(cè)。將測(cè)試片放在水平臺(tái)面上，揭開(kāi)上面的透明薄膜，用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL，均勻加到中央的紙片上，輕輕將上蓋膜放下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下。每個(gè)稀釋度接種兩片。
3.培 養(yǎng)：將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。
4.結(jié)果判斷與計(jì)數(shù)：
細(xì)菌在紙片上生長(zhǎng)后會(huì)顯示紅色斑點(diǎn)，選擇菌落數(shù)適中(10個(gè)～100個(gè))的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)后即為每克(或毫升)樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)。菌落數(shù)在100以?xún)?nèi)時(shí)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告。大于100時(shí)，用二位有效數(shù)字，二位有效數(shù)字后面的數(shù)字，以四舍五入方法計(jì)算，并以10的指數(shù)來(lái)表示。
注意事項(xiàng)：使用過(guò)的紙片上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
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