一、蘇丹heiB染色試劑盒簡(jiǎn)介
脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑(例如乙醇yimi等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲(chǔ)存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結(jié)構(gòu)脂肪,如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等),主要分布于細(xì)胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性。中性脂肪是儲(chǔ)存能量的方式之一,在氧化時(shí)釋放出能量。
在正常情況下,除了脂肪細(xì)胞外,其他細(xì)胞在光學(xué)顯微鏡下幾乎看不到脂滴,如果細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量脂滴,即為脂肪變性。脂肪變性常見于肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腎曲管上皮細(xì)胞等。
中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹heiB、油紅O法等。傳統(tǒng)方法中,常采用蘇丹染料,其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較在原溶劑中的溶解度更大,所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì),使脂質(zhì)呈現(xiàn)出染液的顏色。
蘇丹heiB染色試劑盒染色時(shí),標(biāo)本不宜采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%的福爾馬林)、也不宜采用石蠟切片,需用冰凍切片或碳蠟切片。主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著,常發(fā)生于肝、腎、心等實(shí)質(zhì)臟器的脂肪變性,細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴;鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)生的腫瘤及其性質(zhì)。其中,脂肪瘤、脂肪肉瘤、卵泡膜瘤、腎上腺皮質(zhì)腺瘤等行蘇丹heiB染色后,呈陽性反應(yīng);腎透明細(xì)胞癌、卵巢纖維瘤等行蘇丹heiB染色后,呈陰性反應(yīng)。
二、蘇丹heiB染色試劑盒組成
試劑(A): Sudan black B stain 50ml 100ml RT 避光
試劑(B): Nuclear fast red stain 50ml
100ml RT 避光
使用說明書 1份
三、自備材料
1、載玻片
2、70%的乙醇
3、蒸餾水
4、顯微鏡
5、甘油明膠封固液
四、蘇丹heiB染色試劑盒操作步驟(僅供參考)
1、 新鮮組織低溫切片,一般-20℃~-25℃,如果樣本為脂肪瘤,應(yīng)調(diào)節(jié)到-30℃。
2、 冰凍切片5~10μm,以6~8μm為佳,貼于載玻片上。
3、 70%的乙醇稍微浸洗一下。
4、 入Sudan black B stain中,浸染15~20min。
5、 70%的乙醇洗去多余染色液。 6、 蒸餾水浸洗1min。
7、 Nuclear fast red stain淡染細(xì)胞核5~10min。
8、 自來水稍洗后,蒸餾水稍洗一下。
9、 用濾紙吸去切片及周圍的水分,讓其稍微干燥。
10、 甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。
五、蘇丹heiB染色試劑盒染色結(jié)果
中性脂肪 hei色
磷脂 灰hei色
細(xì)胞核 紅色
六、蘇丹heiB染色試劑盒注意事項(xiàng)
1、 脂肪染色,標(biāo)本不宜采用含有乙醇的固定液、也不宜采用石蠟切片,需用冰凍切片。 2、 在染色過程中必須防止染料發(fā)生沉淀。故切片放入染液時(shí),應(yīng)密封,勿與流動(dòng)空氣相接
觸,避免溶液揮發(fā)時(shí)發(fā)生沉淀。 3、 冰凍切片較易著色,復(fù)染時(shí)應(yīng)避免過染。 4、 蘇丹染料容易褪色,應(yīng)密閉保存。
5、 甘油明膠封固的樣本,保存時(shí)間不長。如需長期保存,可以在蓋玻片與載玻片交界的邊
緣用中性樹膠封閉。
6、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
七、蘇丹heiB染色試劑盒儲(chǔ)存條件:6個(gè)月有效
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