牛腫瘤壞死因子α試劑盒

上海乾思生物公司牛腫瘤壞死因子α試劑盒細胞近3000種，來源于美國ATCC,細胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制，在中國大陸努力搭建正牌細胞與國內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁，提供更多相關(guān)實驗產(chǎn)品，標(biāo)準(zhǔn)品，細胞株和實驗技術(shù)服務(wù)等等前期后續(xù)服務(wù)。選擇正確的實驗試劑或材料是實驗成功的關(guān)鍵。

牛腫瘤壞死因子α試劑盒培養(yǎng)技術(shù)3個原則：1、用自己的一套試劑，不要和別人混用；2、勤觀察細胞，像養(yǎng)寵物一樣喜愛和關(guān)心；3、有規(guī)律地?fù)Q液和傳代，不要“三天打魚，兩天曬網(wǎng)”。

★我?guī)旒毎?000種，來源于美國ATCC,細胞都是經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制。

凍存細胞時間為5-7個工作日，活細胞為7-15個工作日。

★由于細胞庫現(xiàn)有細胞類目多，為了不出現(xiàn)混亂錯誤，需要了解相關(guān)細胞價格及詳細資料請老師，對您造成的不便還請見諒！

【細胞培養(yǎng)】
一、細胞的復(fù)蘇：
非原代培養(yǎng)的細胞一般凍存于液氮之中，需要培養(yǎng)時要先從液氮中取出使之復(fù)蘇。細胞復(fù)蘇的原則——快速融化：必須將凍存在－196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。
具體操作如下：
1、實驗前準(zhǔn)備：
1.1、將水浴鍋預(yù)熱至37℃，并將含10%FBS的培養(yǎng)液置于其中預(yù)熱；
1.2、用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
1.3、在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。
2、取出凍存管及迅速解凍：
2.1、根據(jù)細胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細胞的編號。
2.2、從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。
2.3、迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動，使管中的液體迅速融化，約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內(nèi)。
3、平衡離心 將細胞懸液吸到離心管中，1000～1500rpm離心3分鐘；
4、制備細胞懸液 吸去上清液，加入10 ml培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打均勻，使細胞懸浮；
5、細胞計數(shù) 細胞濃度以5×105/ml為宜。
6、培養(yǎng)細胞
將復(fù)合細胞計數(shù)要求的細胞懸液吸到培養(yǎng)瓶中，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)（略微擰松培養(yǎng)瓶蓋），換液的時間由細胞情況而定。通常，除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感的細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 可直接放入含有10-15ml（5－10倍）新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。