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當(dāng)前位置:上海乾思生物科技有限公司>>自產(chǎn)ELISA試劑盒,試劑盒>>人ELISA試劑盒>> 試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)試劑盒
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2021-07-09 10:08:18瀏覽次數(shù):577次
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大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子試劑盒細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)3個(gè)原則:1、用自己的一套試劑,不要和別人混用;2、勤觀察細(xì)胞,像養(yǎng)寵物一樣喜愛(ài)和關(guān)心;3、有規(guī)律地?fù)Q液和傳代,不要“三天打魚,兩天曬網(wǎng)”。
大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子試劑盒質(zhì)量可靠,售后有保障
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凍存細(xì)胞時(shí)間為5-7個(gè)工作日,活細(xì)胞為7-15個(gè)工作日。
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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的基本操作
【細(xì)胞培養(yǎng)】
一、細(xì)胞的復(fù)蘇:
非原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般凍存于液氮之中,需要培養(yǎng)時(shí)要先從液氮中取出使之復(fù)蘇。細(xì)胞復(fù)蘇的原則——快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
具體操作如下:
1、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
1.1、將水浴鍋預(yù)熱至37℃,并將含10%FBS的培養(yǎng)液置于其中預(yù)熱;
1.2、用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
1.3、在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過(guò)毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。
2、取出凍存管及迅速解凍:
2.1、根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
2.2、從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
2.3、迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化,約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
3、平衡離心 將細(xì)胞懸液吸到離心管中,1000~1500rpm離心3分鐘;
4、制備細(xì)胞懸液 吸去上清液,加入10 ml培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打均勻,使細(xì)胞懸?。?br />5、細(xì)胞計(jì)數(shù) 細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。
6、培養(yǎng)細(xì)胞
將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液吸到培養(yǎng)瓶中,將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)(略微擰松培養(yǎng)瓶蓋),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。通常,除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感的細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 可直接放入含有10-15ml(5-10倍)新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附的問(wèn)題。
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