Thyroglobulin(TG)IgG ELISA樣品收集、處理及保存方法:血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。檢測對象:人血清/血漿及相關液體實驗方法:雙抗原夾心法進行測
Thyroglobulin(TG)IgG ELISA
Thyroglobulin(TG)IgG ELISA樣品收集、處理及保存方法:血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。檢測對象:人血清/血漿及相關液體實驗方法:雙抗原夾心法進行測
ELISA試劑分類: RD試劑盒,GBD試劑盒,IBL試劑盒
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。
不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質,特別是與DNA結合的組蛋白,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細胞膜上的脂類與蛋白質,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質結合而沉淀。
3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍白斑篩選及IPTG誘導的細菌內的蛋白表達等。IPTG和乳糖的結構相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結合,
使阻遏蛋白的空間構像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,
IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍白斑篩選。作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩(wěn)定。
4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍色。常跟IPTG一起用與藍白斑篩選。
5、G418:一種抗生素,對幾乎所有的細胞都有毒性,是穩(wěn)定轉染zui常用的選擇試劑。當neo基因被整合進真核細胞基因組合適的地方
6、DMSO:二甲基亞砜。實驗室常用于作液體層析溶劑,同時用作測試物質紫外消光值上時用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細胞裂解液成分之一,在保護蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,而對核膜破壞的作用弱,結合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內參和抗體稀釋液。
10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,也用于穩(wěn)定毛細管電泳中的變性單股DNA。
注意事項:
1、去正規(guī)耗材經銷處。
2、注意耗材的防偽標志?,F(xiàn)在各大廠商的耗材都增加了不同的防偽標志。如果貼有防偽標準,注意是正好貼在封口處,如果拆封了的話標志也會碎了。
一、常見elisa試劑盒
1、細胞因子檢測試劑盒:
如白介素、選擇素、集落刺激因子,腫瘤壞死因子,干擾素,轉化生長因子,趨化因子,細胞因子受體,粘附分子,生長因子,凋亡因子等等
2、肝纖維化檢測elisa試劑盒:
如纖維連接蛋白,透明質酸,膠原,基質金屬蛋白酶抑制因子,基質金屬蛋白酶,層粘蛋白等等
3、心肌梗塞檢測elisa試劑盒:
如肌鈣蛋白,肌紅蛋白,C-反應蛋白等等
4、內分泌檢測elisa試劑盒:
如免疫球蛋白,抗鏈O-aso,類風濕因子RF,C反應蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉鐵蛋白transferrin等等
二、食品安全檢驗elisa試劑盒:
食品中的激素、藥物、霉菌毒素、過敏原殘留、轉基因產品的檢測試劑盒,以及微生物、維生素等的檢測產品。
三、植物病毒、細菌、真菌、植物激素和轉基因作物的農業(yè)診斷試劑盒
四、動植物疾病診斷類如豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測試劑盒