菌落計(jì)數(shù)器廣泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗(yàn)。是各級隆重防疫站、環(huán)境監(jiān)測站、食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所、醫(yī)院、生物制品所、藥檢所、商檢局、食品廠、飲料廠、化妝品廠、日化廠及大專院校、科研單位實(shí)驗(yàn)室的儀器。 菌落總數(shù)的測定現(xiàn)常用菌落計(jì)數(shù)器進(jìn)行測定,一般將被檢樣品制成幾個(gè)不同的10倍遞增稀釋液,然后從每個(gè)稀釋液中分別取出1mL置于滅菌平皿中與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混合,在一定溫度下,培養(yǎng)一定時(shí)間后(一般為48小時(shí)),記錄每個(gè)平皿中形成的菌落數(shù)量,依據(jù)稀釋倍數(shù),計(jì)算出每克(或每ml)原始樣品中所含細(xì)菌菌落總數(shù)。
菌落計(jì)數(shù)器的安全檢測方法:
1.操作方法:培養(yǎng)到時(shí)間后,計(jì)數(shù)每個(gè)平板上的菌落數(shù)。可用肉眼觀察,必要時(shí)用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平板的菌落總數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù),計(jì)算處原始樣品中每克(或每ml)中的菌落數(shù),進(jìn)行報(bào)告。
2.到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間,應(yīng)立即計(jì)數(shù)。如果不能立即計(jì)數(shù),應(yīng)將平板放置于0-4℃,但不得*過24h。
3.計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選取菌落數(shù)在30~300之間的平板(SN標(biāo)準(zhǔn)要求為25~250個(gè)菌落),若有二個(gè)稀釋度均在30~300之間時(shí),按國家標(biāo)準(zhǔn)方法要求應(yīng)以二者比值決定,比值小于或等于2取平均數(shù),比值大于2則其較小數(shù)字(有的規(guī)定不考慮其比值大小,均以平均數(shù)報(bào)告)。
4.若所有稀釋度均不在計(jì)數(shù)區(qū)間。如均大于300,則取較為高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。如均小于30,則以較為低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報(bào)告之。如菌落數(shù)有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之間,則應(yīng)以較為接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。如所有稀釋度均無菌落生長,則應(yīng)按小于1乘以較為低稀釋倍數(shù)報(bào)告之。有的規(guī)定對上述幾種情況計(jì)算出的菌落數(shù)按估算值報(bào)告。
5.不同稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)與稀釋倍數(shù)成反比(同一稀釋度的二個(gè)平板的菌落數(shù)應(yīng)基本接近),即稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少,稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,則應(yīng)視為檢驗(yàn)中的差錯(cuò)(有的食品有時(shí)可能出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,如酸性飲料等),不應(yīng)作為檢樣計(jì)數(shù)報(bào)告的依據(jù)。
6.當(dāng)平板上有鏈狀菌落生長時(shí),如呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限,則應(yīng)作為一個(gè)菌落計(jì),如存在有幾條不同來源的鏈,則每條鏈均應(yīng)按一個(gè)菌落計(jì)算,不要把鏈上生長的每一個(gè)菌落分開計(jì)數(shù)。如有片狀菌落生長,該平板一般不宜采用,如片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻,則可以半個(gè)平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。
7.當(dāng)計(jì)數(shù)平板內(nèi)的菌落數(shù)過多(即所有稀釋度均大于300時(shí)),但分布很均勻,可取平板的一半或1/4計(jì)數(shù)。再乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)作為該平板的菌落數(shù)。
8.菌落數(shù)的報(bào)告,按國家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定菌落數(shù)在1~100時(shí),按實(shí)有數(shù)字報(bào)告,如大于100時(shí),則報(bào)告前面兩位有效數(shù)字,第三位數(shù)按四舍五入計(jì)算。固體檢樣以克(g)為單位報(bào)告,液體檢樣以毫升(ml)為單位報(bào)告,表面涂擦則以平方厘米(cm2)報(bào)告。