菌落計(jì)數(shù)器在皮氏培養(yǎng)皿上計(jì)算微生物的數(shù)目是一件非常耗時(shí)的工作。有了菌落計(jì)數(shù)器這種儀器,用戶就不必為這項(xiàng)復(fù)雜的操作費(fèi)心了,它可廣泛應(yīng)用在每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室中。
菌落計(jì)數(shù)器基本操作一般包括:樣品的稀釋--傾注平皿--培養(yǎng)48小時(shí)--計(jì)數(shù)報(bào)告
1.操作方法:培養(yǎng)到時(shí)間后,計(jì)數(shù)每個(gè)平板上的菌落數(shù)??捎萌庋塾^察,必要時(shí)用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平板的菌落總數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落數(shù),計(jì)算處原始樣品中每克(或每ml)中的菌落數(shù),進(jìn)行報(bào)告。
2.到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間,應(yīng)立即計(jì)數(shù)。如果不能立即計(jì)數(shù),應(yīng)將平板放置于0-4℃,但不得超過(guò)24h。
3.計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選取菌落數(shù)在30~300之間的平板(SN標(biāo)準(zhǔn)要求為25~250個(gè)菌落),若有二個(gè)稀釋度均在30~300之間時(shí),按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法要求應(yīng)以二者比值決定,比值小于或等于2取平均數(shù),比值大于2則其較小數(shù)字(有的規(guī)定不考慮其比值大小,均以平均數(shù)報(bào)告)。
4.若所有稀釋度均不在計(jì)數(shù)區(qū)間。如均大于300,則取zui高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。如均小于30,則以zui低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報(bào)告之。如菌落數(shù)有的大于300,有的又小于30,但均不在30~300之間,則應(yīng)以zui接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之。如所有稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng),則應(yīng)按小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)報(bào)告之。有的規(guī)定對(duì)上述幾種情況計(jì)算出的菌落數(shù)按估算值報(bào)告。
5.不同稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)與稀釋倍數(shù)成反比(同一稀釋度的二個(gè)平板的菌落數(shù)應(yīng)基本接近),即稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少,稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,則應(yīng)視為檢驗(yàn)中的差錯(cuò)(有的食品有時(shí)可能出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,如酸性飲料等),不應(yīng)作為檢樣計(jì)數(shù)報(bào)告的依據(jù)。
6.當(dāng)平板上有鏈狀菌落生長(zhǎng)時(shí),如呈鏈狀生長(zhǎng)的菌落之間無(wú)任何明顯界限,則應(yīng)作為一個(gè)菌落計(jì),如存在有幾條不同來(lái)源的鏈,則每條鏈均應(yīng)按一個(gè)菌落計(jì)算,不要把鏈上生長(zhǎng)的每一個(gè)菌落分開(kāi)計(jì)數(shù)。如有片狀菌落生長(zhǎng),該平板一般不宜采用,如片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻,則可以半個(gè)平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。
7.當(dāng)計(jì)數(shù)平板內(nèi)的菌落數(shù)過(guò)多(即所有稀釋度均大于300時(shí)),但分布很均勻,可取平板的一半或1/4計(jì)數(shù)。再乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)作為該平板的菌落數(shù)。
8.菌落數(shù)的報(bào)告,按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定菌落數(shù)在1~100時(shí),按實(shí)有數(shù)字報(bào)告,如大于100時(shí),則報(bào)告前面兩位有效數(shù)字,第三位數(shù)按四舍五入計(jì)算。固體檢樣以克(g)為單位報(bào)告,液體檢樣以毫升(ml)為單位報(bào)告,表面涂擦則以平方厘米(cm2)報(bào)告。