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校準(zhǔn)移液器是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟。以下是手把手教你校準(zhǔn)移液器的詳細(xì)步驟:
一、準(zhǔn)備工作
工具和材料
精密天平(精度至少為0.01 mg)
蒸餾水或去離子水
量筒(用于測量蒸餾水)
校準(zhǔn)砝碼(用于校準(zhǔn)天平)
移液器吸頭(與移液器匹配的高質(zhì)量吸頭)
移液器校準(zhǔn)記錄表
溫度計(jì)(測量水溫)
濕度計(jì)(測量環(huán)境濕度)
手套和防護(hù)裝備(確保操作無污染)
環(huán)境要求
環(huán)境溫度:20°C ± 2°C
環(huán)境濕度:50% ± 10%
避免氣流、震動(dòng)和電磁干擾
二、校準(zhǔn)步驟
校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備
確保移液器清潔且干燥。
檢查移液器是否需要維護(hù)或更換密封圈。
在開始校準(zhǔn)前至少30分鐘,將所有工具和材料放置在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中,使其達(dá)到環(huán)境平衡。
天平校準(zhǔn)
打開天平,進(jìn)行預(yù)熱(根據(jù)天平說明書的要求)。
使用校準(zhǔn)砝碼進(jìn)行天平校準(zhǔn),確保天平讀數(shù)準(zhǔn)確。
確認(rèn)天平校準(zhǔn)完畢后,將天平調(diào)零。
準(zhǔn)備蒸餾水
測量并記錄水溫(理想溫度為20°C)。
根據(jù)溫度,查找水的密度(參考密度表)。
吸取和稱量
將吸頭浸入水中2-3毫米。
緩慢平穩(wěn)地吸取水樣。
等待1-2秒,確保吸頭內(nèi)液體穩(wěn)定。
將吸頭移到天平上方。
緩慢釋放移液器按鈕,將水樣排到天平的稱量盤上。
設(shè)置移液器至校準(zhǔn)所需的體積(如10µL、100µL、1000µL)。
選擇適配的吸頭,安裝到移液器上。
使用正確的移液技術(shù)吸取水樣:
記錄天平讀數(shù)(質(zhì)量)。
重復(fù)操作
對每個(gè)體積進(jìn)行至少10次重復(fù)操作,記錄每次稱量的質(zhì)量。
計(jì)算體積
使用以下公式計(jì)算每次稱量的體積:其中, 是體積(µL), 是質(zhì)量(mg), 是水的密度(mg/µL,取決于水溫)。
計(jì)算誤差
計(jì)算每次測量的平均體積()。
計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD):其中, 是每次測量的體積, 是測量次數(shù)。
計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD):
計(jì)算系統(tǒng)誤差(系統(tǒng)誤差 = 平均體積 - 設(shè)定體積)。
三、評估結(jié)果
精度和準(zhǔn)確度
比較計(jì)算出的平均體積和設(shè)定體積的差異(系統(tǒng)誤差)。
檢查相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),確保在移液器規(guī)定的允許范圍內(nèi)。
調(diào)整移液器
如果誤差超出允許范圍,根據(jù)移液器說明書進(jìn)行調(diào)整(通常通過移液器上的調(diào)節(jié)螺釘)。
調(diào)整后重新進(jìn)行校準(zhǔn),直至誤差在允許范圍內(nèi)。
記錄和報(bào)告
填寫移液器校準(zhǔn)記錄表,包括每次測量的體積、平均體積、標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。
保存校準(zhǔn)記錄,以備將來審查。
四、后續(xù)維護(hù)
定期校準(zhǔn)
根據(jù)使用頻率和實(shí)驗(yàn)要求,定期校準(zhǔn)移液器(通常每3-6個(gè)月一次)。
日常維護(hù)
每次使用后清潔移液器,特別是在處理高風(fēng)險(xiǎn)樣本后。
避免粗暴操作,正確存放移液器。
通過上述步驟,可以確保移液器的精度和準(zhǔn)確性,從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。如果在校準(zhǔn)過程中遇到復(fù)雜或無法解決的問題,建議聯(lián)系廠家或?qū)I(yè)技術(shù)人員進(jìn)行維護(hù)和維修。