目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>檢測試劑盒>> TO1203茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)
供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | TO1203 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥,綜合 |
茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶葉中多酚類物質的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,
是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,兒茶素占60~80%,具有C6-C3-C6碳骨架結構,是一種重要的天然抗氧化物質,
能夠清除自由基。類物質茶多酚又稱茶鞣或茶單寧,是形成茶葉色香味的主要成份之一,也是茶葉中有保健功能的主要成份之一
,研究表明茶多酚等活性物質具解毒和抗輻射作用,能有效地阻止放射性物質侵入骨髓,并可使鍶90和鈷60迅速排出體外。
茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物,利用茶多酚與酒石酸鐵反應,生成穩(wěn)定紫藍色
化合物,以酶標儀540nm處測定吸光度,在一定范圍內吸光度與顏色深淺的變化成正比,與標準曲線比較進而計算茶多酚含量,
主要用于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領域,
不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
自備材料:
1、蒸餾水
2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管
3、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋、酶標儀、酶標板
操作步驟(僅供參考):
1、準備樣品∶
①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,4℃ 10000r/min
離心15~20min,留取上清液,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測。
②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于苯丙解氨的檢測。
③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液,如果有必要需進行適當勻漿,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,
-20℃凍存,用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,可以使用蒸餾水或PAL
Lysis Buffer稀釋進行恰當的稀釋。
2、PAL加樣∶
取96孔板,按照下表設置對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并
注意避免產生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行孔,
求平均值。
加入物(μl)對照孔測定孔
蒸餾水150100
待測樣本5050
PAL Assay Buffer-50
3、PAL檢測︰
以對照孔為對照(調零),酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為 A測定0);40℃準確孵育1h,立即加入10μl PAL終止
液終止反應(備選方案),以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。
注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟,可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調零,酶標儀立即測定290nm處測定
孔的吸光度。
注意事項∶
1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,同時需避免反復凍融。
2、獲得上清液為PAL酶液,應盡快檢測,亦可-20°℃保存。
3、如果沒有可測定紫外區(qū)的酶標儀和酶標板,也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿,但應注意比色杯的最小檢測體積。
4、每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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