目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>檢測試劑盒>> YS0757全血丙酮酸檢測試劑盒(乳酸脫氫酶微板法)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | YS0757 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥,綜合 |
(Pyruvic acid,PA)又稱2-氧代丙酸酮,是參與整個生物體基本代謝的中間產物之一,可通過和三羧酸循
環(huán)實現(xiàn)體內糖、脂肪和氨基酸間的互相轉化,在三大營養(yǎng)物質的代謝聯(lián)系中起著重要的樞紐作用。是糖無氧
代謝的產物,科研工作者常將丙酮酸和乳酸一起研究,并用二者的比值推算循環(huán)衰竭的程度
。丙酮酸檢測可采用乳酸脫氫酶催化法或二硝基苯肼比色法。
全血丙酮酸檢測試劑盒(乳酸脫氫酶微板法)檢測原理是在酸性條件下,與二硝基苯肼反應,生成-二硝基苯
腙復合物,后者經(jīng)氧化呈棕紅色,通過酶標儀測定520nm處吸光度,據(jù)此通過與標準曲線對比可以計算出PA水平。該試劑
盒可用于檢測植物、細胞或組織、血清等樣品中內源性的含量,尤其適用植物樣品含量的檢測。該試劑盒僅用
于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
1、取內徑為8mm的玻璃試管2支,分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。
2、靜脈采血1ml,立即取下針頭,沿管壁向各試管注入血液0.5ml,立即混勻并啟動秒表計時,并置于37℃水浴中。
3、每隔10s輕搖試管一次,觀察管內血液流動情況,直至血液凝固。記錄血液凝固所需時間,即為ACT。
4、取2支試管血液凝固時間的平均值作為ACT 值。
計算:參考區(qū)間: (1.77±0.76)min
4、配制標準品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_到60μg/ml,如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_到60μg/ml。
注意事項:
1、實驗材料應盡量新鮮,如取材后不立即使用,應存于-20°C.
2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。
3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請小心操作。
4、TA標定液容易長菌,宜4℃保存,一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請棄用。
5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M TA滴定液進行滴定。
6、TA滴定液含量計算公式中,V0最好為3次空白測定的平均值。
7、如果所測樣品的濃度過高,應用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,并將稀釋倍數(shù)帶入公式。
8、如果樣品顏色較深,滴定終點不易觀察,應采用電位滴定法。
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