目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> A3831-00HotStart Bst4.2大規(guī)格試劑
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 100萬U |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A3831-00 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥 |
| 主要用途 | 科研實驗 |
HotStart Bst4.2大規(guī)格試劑經酶電子重構架和
進化篩選（in silico Design & invitro Evolution），其為 Bst
4.0 的升級品，通用于 DNA 或 RNA 的 LAMP 或 RT-LAMP
擴增。
性能提升包括：（1）Bst 4.2 包含熱啟動 Aptamer，
該配體確保酶在<30℃時，酶活封閉效率>90%,在>60℃
時 1min 內釋放酶活。該特性利于室溫建立反應體系，
并大幅降低了低溫條件下的非特異擴增；（2）反應溫度提
升到 70℃，大幅降低引物 Dimer 的形成，提高擴增特異
性，并使得粗樣品核酸釋放更加充分；（3）全系包含
Helicaser，因此，允許在不使用 F3/B3 引物的情況下進
行 eLAMP 擴增（easy LAMP），并允許 FIP/BIP 的引物
用量降低一倍。這將進一步降低非特異擴增，并使得擴增
均一性大幅提升。
名 稱 1600 U 16 KU
HotStart Bst 4.2（16U/μl） 100 μl 1 ml
10xIsoBuffer4.2 (Mg2+ free) 1 ml 20 ml
100mM Mg2+ 1 ml 20 ml
注意： HotStart Bst 4.2 DNA/RNA Polymerase（16U/μl）
與 10xIso Buffer4.2 均不含有甘油，可用于凍干體系的建
立。
儲存：長期保存請置于-20℃以下（18 個月有效）；制品
反復凍融 10 次不影響性能，但應避免反復凍融；制品一
經融化推薦置于 2-8℃保存，在此條件下制品穩(wěn)定儲存 1
個月。
其它說明：
（1） Bst 4.2 & 3.2 Polymerase 在用于 LAMP 擴增時的
推薦反應溫度為 70℃。由于 Helicaser 的反應溫度為
70℃，因此該酶在 65℃擴增時，性能會大幅下降。
（2）制品中包含高濃度的鹽組分，使用時做好個人防護，
防止制品與皮膚、眼、鼻、呼吸道等接觸和吸入，一旦接
觸或吸入，請用大量的清水沖洗。
（3）防止氣溶膠污染，盡可能進行分區(qū)操作。
1. 10xLAMP Primer Mix 的配制
標準 LAMP eLAMP
FIP/BIP 16 µM each 8~16 µM each
LF/LB 4~8 µM each 4~8 µM each
F3/B3 2 µM each 非必須
注意：eLAMP（easy LAMP）為去除 F3/B3 引物的方法，
為 Bst4.2-3.2 系列專用的使用策略，對于大多數引物組，
在 Helicaser 的加持下，擴增速度幾乎不受影響。
2. 配制 LAMP 反應體系
10xIsoBuffer4.2(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
1.5 μl
dNTP Mixture（10 mM each） 3 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
HotStart Bst 4.2（16U/μl） 0.25-0.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 25 μl
HotStart Bst4.2大規(guī)格試劑注意：關于 Bst 酶的用量，對于絕大多數的 LAMP 擴增
來講，0.16-0.32U/µl 的濃度，均可獲得理想的擴增結果，
必要條件下進行其它調整。
3. 擴增反應
反應體系配好后，置于 70°C 反應 20~40min。
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