目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>ATCC細(xì)胞>> YS4937C小鼠肺成纖維細(xì)胞ATCC
供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | T25瓶/2冷凍管 |
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貨號 | YS4937C | 主要用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞名稱:小鼠肺成纖維細(xì)胞ATCC
細(xì)胞代次:P4
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運(yùn)輸費(fèi))
細(xì)胞凍存:無血清凍存液
細(xì)胞傳代:第一次建議1:2
1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,zui后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞*貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中, 1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,接種25cm2培養(yǎng)瓶,于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別?細(xì)胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細(xì)胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細(xì)胞增殖形成匯合地單層細(xì)胞或密集地細(xì)胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義,*次收獲和接種的細(xì)胞被稱為原代細(xì)胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細(xì)胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞zui大的生長空間,以保持細(xì)胞群中基因型和表型的*性。細(xì)胞系是不斷生長,分化的細(xì)胞群,因其經(jīng)過遺傳改造,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研。實(shí)際上,連續(xù)細(xì)胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),隨著代數(shù)的增加細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
1、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長。
2、接收到的凍存細(xì)胞該如何處理?收到包裝箱后,立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細(xì)胞儲存在-80℃,這樣會對細(xì)胞造成不可挽回的傷害。
3、有多少經(jīng)驗(yàn)才能開始正常人類細(xì)胞培養(yǎng)?推薦有經(jīng)驗(yàn)者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有經(jīng)驗(yàn)的話對其它細(xì)胞類型也是很有利的。如果你是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,我們會為你提供幫助。請的細(xì)胞培養(yǎng)專家。
售后服務(wù)告知書
1)細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
二)細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
7. 視具體情況而定。
YS4846C人成纖維細(xì)胞GM00526
YS4847C人B淋巴細(xì)胞GM50152
YS4848C卵巢癌細(xì)胞caov-4
YS4849C褐家鼠腦海馬體成纖維細(xì)胞H19-7/IGF-IR
YS4850C小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞MOVAS
YS4851C小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞RGC-5
YS4852C小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS53
YS4853C肺間皮瘤細(xì)胞NCI-H2052
YS4854C人直腸腺癌細(xì)胞SW1463
YS4855C人表皮樣癌細(xì)胞A-431-LUC2
YS4856CIL10報(bào)告293細(xì)胞IL-10ReporterHEK293Cells
YS4857C人肺腺癌腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞HUMAN LUNG ADENOCARCINOMA CAFS
YS4858CNFAT-Luc 報(bào)告基因 T 淋巴細(xì)胞Jurkat-Lucia NFAT Cells
YS4859C牙骨質(zhì)IDG-CM6
YS4860C人B細(xì)胞淋巴瘤ri-1
YS4861C卵巢腺癌細(xì)胞EFO-27
YS4862C人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞KMS-12-PE
YS4863C胰腺腺癌細(xì)胞T3M-4
YS4864C人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞MIA PaCa-2
YS4865C成人急性髓系白血病細(xì)胞SKM-1
YS4866C小鼠淋巴母細(xì)胞b淋巴細(xì)胞TC1
YS4867C小鼠髓樣乳腺癌貼壁細(xì)胞EO771
YS4868C小鼠淋巴瘤細(xì)胞L5178YTK
YS4869C小鼠胚胎成纖維細(xì)胞3T3-swissalbino
YS4870C小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞P815
YS4871C人黑色素瘤細(xì)胞A375.S2
YS4872C肺支氣管癌ChaGo-K-1
YS4873CRAW-Dual CellsRAW-Dual
YS4874C人前列腺癌細(xì)胞MDA-PCA-2B
YS4875C人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞C8166(C8166-CD4)
YS4876C人胚胎腎細(xì)胞293T
YS4877C小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H889
YS4878C大鼠肺泡Ⅱ型細(xì)胞RLE-6TN
YS4879C人縱狀神經(jīng)纖維瘤細(xì)胞hTERT ipNF95.6
YS4880C人食道癌腫瘤細(xì)胞Colo680N
YS4881C口腔舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞CAL-33
YS4882C小鼠肺腺癌細(xì)胞系LA795
YS4883C腦星形細(xì)胞瘤SW1783
YS4884C小鼠T淋巴細(xì)胞CTLL-2
YS4885C人甲狀腺癌細(xì)胞ACT-1
YS4886C人肝癌細(xì)胞JHH4
YS4887C唐氏綜合癥背景羊水來源細(xì)胞GM03606
YS4888C膀胱癌細(xì)胞Ku1919
YS4889C肺癌大細(xì)胞瘤HCC1438
YS4890C人卵巢癌細(xì)胞OVCAR-8
YS4891C惡性黑色素瘤細(xì)胞Malme3M
YS4892C小鼠骨髓瘤雜交瘤細(xì)胞BB7.1
YS4893C小鼠骨髓瘤雜交瘤細(xì)胞ME 1
YS4894C小鼠骨髓瘤雜交瘤細(xì)胞BBM.1
YS4895C小鼠骨髓瘤雜交瘤細(xì)胞L243
YS4896C小鼠骨髓瘤雜交瘤細(xì)胞4E11
YS4897C小鼠骨髓瘤雜交瘤細(xì)胞BB7.7
YS4898C小鼠骨髓瘤雜交瘤細(xì)胞IGG-6A6
YS4899C小鼠骨髓瘤雜交瘤細(xì)胞9.3F10
YS4900C小鼠神經(jīng)干細(xì)胞NE-GFP-4C
YS4901C人成纖維細(xì)胞GM00325
YS4902C羊水衍生細(xì)胞GM02422
YS4903C小鼠胚胎瘤細(xì)胞ATDC5
YS4904C人肝細(xì)胞THLE-3
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