目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>ATCC細(xì)胞>>ATCC原裝細(xì)胞系>> YS165C食管鱗癌KYSE150細(xì)胞ATCC
參考價(jià) | ¥ 1800 |
訂貨量 | ≥1件 |
¥1800 |
≥1件 |
更新時(shí)間:2024-10-21 11:10:08瀏覽次數(shù):125評(píng)價(jià)
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | T25瓶/2冷凍管 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | YS165C | 主要用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞名稱(chēng):食管鱗癌KYSE150細(xì)胞ATCC
細(xì)胞代次:P4
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運(yùn)輸費(fèi))
細(xì)胞凍存:無(wú)血清凍存液
細(xì)胞傳代:第一次建議1:2
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無(wú)菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時(shí)要將蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,以便進(jìn)行對(duì)比培養(yǎng))
培養(yǎng)步驟
細(xì)胞傳代:如果未超過(guò)80%匯合度時(shí),將瓶裝的培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細(xì)胞密度超80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下細(xì)胞傳代:
A1、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
A2、懸浮細(xì)胞凍存:
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),將T25 培養(yǎng)瓶中的懸液收集至離心管中1000rpm
離心5min;
2、棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml/支的雅吉生物無(wú)血清凍存液(C7001),混勻后加入凍存管中。(如:凍一支,加入 1ml 無(wú)血清凍存液即可)
3、將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可;如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,需在-80℃冰箱存
放 24 小時(shí)以上。
B1、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考如下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,使之脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25瓶),補(bǔ)充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
B2、貼壁細(xì)胞凍存:
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無(wú)血清凍存液(貨號(hào):C7001),混勻后加入凍存管中。
細(xì)胞復(fù)蘇:
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意佩戴防護(hù)面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):有些細(xì)胞比較特殊,如貼壁不牢,在運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生容易細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。請(qǐng)將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過(guò)渡培養(yǎng)(后期對(duì)比培養(yǎng)),沉淀加入消化液1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25),補(bǔ)充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
售后服務(wù)告知書(shū)
1)細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問(wèn)題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
二)細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶(hù)造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫(kù)推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
7. 視具體情況而定。
YS163CKB人口腔上皮癌細(xì)胞
YS164CKetr-3人腎癌細(xì)胞
YS165C食管鱗癌KYSE150
YS166C食管癌KYSE410
YS167C食管癌KYSE450
YS168CKYSE510人食管癌細(xì)胞
YS169CL-02正常肝細(xì)胞
YS170CL1210小鼠白血病細(xì)胞
YS171CL929小鼠成纖維細(xì)胞
YS172C肺腺癌LA795瘤
YS173C瘤LAN-5神經(jīng)母細(xì)胞
YS174CLewis小鼠肺癌細(xì)胞
YS175CLLC小鼠肺癌細(xì)胞
YS176C小鼠骨肉瘤LM-8
YS177C前列腺癌LNCaP
YS178CLNCaPcloneFGC人前列腺癌細(xì)胞
YS179CLOVO人結(jié)腸癌細(xì)胞
YS180CLs-174-T人結(jié)腸癌細(xì)胞
YS181C肺癌LTEP-P(圓形)小細(xì)胞
YS182CM1小鼠白血病細(xì)胞
YS183CM14人黑色素瘤細(xì)胞
YS184C瘤M17神經(jīng)母細(xì)胞
YS185CMA104非洲綠猴胚胎腎上皮細(xì)胞
YS186CMA-891小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞
YS187CMCF-7人乳腺癌細(xì)胞
YS188CGL261小鼠膠質(zhì)細(xì)胞
YS189CMDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞
YS190CMDA-MB-435人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞
YS191CMDA-MB-435S人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
YS192CMDA-MB-453人乳腺癌細(xì)胞
YS193CMDA-MB-468人乳腺癌細(xì)胞
YS194CMDCK狗腎細(xì)胞
YS195CMFC小鼠胃癌細(xì)胞
YS196CMG-63人成骨肉瘤細(xì)胞
YS197C胃腺癌MGC-803
YS198CMGC-823人低分化前胃癌細(xì)胞
YS200CMKN-28人胃癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞
YS201CMKN45人胃癌細(xì)胞
YS202C長(zhǎng)臂猿淋巴瘤MLA-144
YS203CMOLT-4白血病細(xì)胞人急性淋巴母細(xì)胞
YS204C癌MPC-83胰腺腺泡細(xì)胞
YS205CMRC-5人胚肺成纖維細(xì)胞
更多細(xì)胞歡迎咨詢(xún)我們:食管鱗癌KYSE150細(xì)胞ATCC
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)