化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
垂直電泳實(shí)驗(yàn)中用到的試劑介紹
詳細(xì)介紹
垂直電泳
一、蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品
Precision Plus Protein標(biāo)準(zhǔn)品有未染、全藍(lán)、雙色、Kaleidoscope、WesternC和Dual Xtra六種選擇。全藍(lán)、雙色、Dual Xtra和WesternC含有三條高亮度參考條帶（25、50和75kD）方便凝膠方向的判斷。Precision Plus Protein標(biāo)準(zhǔn)品的特點(diǎn)如下：
l 清晰的窄條帶可用于精確的分子量估算；
l 精確的分子量數(shù)值，經(jīng)質(zhì)譜驗(yàn)證；
l 的染色技術(shù)確保批次間分子量的*性，以及電泳遷移圖譜的良好重復(fù)性；
l 每個(gè)未染的蛋白條帶都含有一個(gè)*的Strep標(biāo)記的親和多肽，可進(jìn)行Western雜交檢測(cè)和分子量確定；
l 天然熒光便于多種熒光檢測(cè)；
l 適用于Criterion Stain Free凝膠成像系統(tǒng)。
Precision Plus Protein Dual Xtra標(biāo)準(zhǔn)品
Precision Plus Protein Dual Xtra標(biāo)準(zhǔn)品含有12條預(yù)染條帶，分子量范圍從2到250kD，可用來(lái)監(jiān)測(cè)電泳和轉(zhuǎn)印效率。2kD和5kD條帶利于低分子量蛋白的檢測(cè)。粉色的2kD條帶易于從藍(lán)色染料前沿中辨識(shí)。Dual Xtra蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的優(yōu)點(diǎn)包括：
l 寬范圍分子量應(yīng)用更廣；
l 2kD和5kD蛋白帶；
l 清晰、明亮，預(yù)染的12條蛋白帶可精確的進(jìn)行分子量確定；
l 顯眼的粉色條帶作為參照和方向定位；
l 天然熒光屬性利于多元化應(yīng)用；
l 分子量和遷移率的批次間具高度*性。
Precision Plus Protein WesternC 標(biāo)準(zhǔn)品
Precision Plus Protein WesternC 標(biāo)準(zhǔn)品含有10條蛋白條帶偶聯(lián) StrepTactin 偶聯(lián)物可用于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)蛋白條帶可顯示在凝膠轉(zhuǎn)印膜膠片或 CCD 圖像中預(yù)染條帶可檢測(cè)電泳過(guò)程評(píng)估轉(zhuǎn)印效果每個(gè)條帶均帶有 Strep-標(biāo)簽可進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。
優(yōu)點(diǎn)包括：
l 高精確度計(jì)算MW-R值>0.99；
l 雙色預(yù)染條帶25、50和75 kD 3個(gè)條帶為粉色；其他條帶預(yù)染為藍(lán)色；
l 結(jié)果整潔清晰精確
l 所有條帶含有 Strep-標(biāo)簽當(dāng)使用 StrepTactin-HRP時(shí)可被化學(xué)發(fā)光檢測(cè)
l 天然熒光屬性利于多種應(yīng)用
l 無(wú)需稀釋方便隨時(shí)使用
二、制膠試劑
丙烯酰胺
聚丙烯酰胺是一種常用的電泳基質(zhì)，由丙烯酰胺與低聚物交聯(lián)劑（如甲叉雙丙烯酰胺，bis ） 的自由基聚合而成?？煽康碾娪窘Y(jié)果取決于這一反應(yīng)的可重復(fù)性，高純度的起始試劑是影響凝膠質(zhì)量的一個(gè)重要因素。Bio-Rad的99.9%超純丙烯酰胺經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的純化和測(cè)試，確保了凝膠聚合均一所需的一切品質(zhì)。丙烯酰胺有3種形式，可滿足每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的需要：
■■ 丙烯酰胺粉劑 — 丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺粉劑產(chǎn)品使?jié)舛群捅０?/span>/甲叉雙丙烯酰胺比率可調(diào)
■■ 預(yù)混合丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺粉劑 — 含量固定的組份，直接加入量的超純水即可配制成30-50%的儲(chǔ)存液
■■ 丙烯酰胺預(yù)混液 — 可直接使用，有2種濃度 （ 30% 和40% ），3 種不同的丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺比例（ 19:1，29:1 和 37.5:1 ）
三、預(yù)混緩沖液
預(yù)混合電泳緩沖液
預(yù)混合轉(zhuǎn)印緩沖液
四、垂直電泳預(yù)制膠
Mini-PROTEAN TGX 預(yù)制膠
保質(zhì)期更長(zhǎng)的 Mini-PROTEAN TGX 預(yù)制膠為創(chuàng)新的凝膠系統(tǒng)，使用標(biāo)準(zhǔn)的Tris/甘氨酸電泳緩沖液可提供類(lèi)似Laemmli的分離模式。Mini-PROTEAN 膠兼容 Mini-PROTEAN Tetra （1-4塊膠） 和 Dodeca 電泳槽（1-12 塊膠），這類(lèi)膠還可用于 Mini-PROTEAN 3 電泳槽，同時(shí)提供轉(zhuǎn)印用Mini Trans-Blot 電泳槽和預(yù)切膜三明治。
優(yōu)點(diǎn)包括：
■■ 直接用于Laemmli系統(tǒng)
■■ 緩沖體系不昂貴??低運(yùn)行成本
■■ 電泳時(shí)間短
■■ 準(zhǔn)確的分子量評(píng)估
■■ 適用于復(fù)雜樣品
■■ 底部開(kāi)放式膠盒設(shè)計(jì)使凝膠的操作和轉(zhuǎn)印更方便
■■ 膠盒打開(kāi)方便??更快進(jìn)入下游實(shí)驗(yàn)
五、蛋白染色劑
考馬斯染色劑
Bio-Safe 考馬斯亮藍(lán)G-250 染料
Bio-Safe 考馬斯染色劑G-250 染色劑是一種預(yù)混合的無(wú)毒溶液，脫色過(guò)程無(wú)需甲醇和醋酸。Bio-Safe 染色劑在清晰背景上產(chǎn)生藍(lán)色條帶。Bio-Safe 考馬斯染色劑的使用快速、靈敏、便利。優(yōu)點(diǎn)包括：
??水相染色—無(wú)需特殊處理和通風(fēng)櫥
??凝膠浸于染色劑時(shí)條帶隨即可見(jiàn)
??無(wú)廢液處理問(wèn)題及費(fèi)用
考馬斯亮藍(lán)R-250 染色劑和脫色液
考馬斯亮藍(lán)R-250 染色劑是對(duì)蛋白聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行考馬斯染色的zui快速簡(jiǎn)便的方法。考馬斯R-250 染色液和考馬斯R-250 脫色液可直接使用。
??檢測(cè)聚丙烯酰胺凝膠上納克級(jí)蛋白和核算
??高通量—能染色12 塊大規(guī)模凝膠（26.5*23cm）
??操作方便的濃縮液形式
銀染Plus 試劑盒
銀染Plus 是zui靈敏、使用zui簡(jiǎn)便的銀染色劑。銀染Plus 試劑盒源于Gottlied 和Chavko（1987）所開(kāi)發(fā)的檢測(cè)瓊脂糖凝膠上天然和變性真核DNA的方法。該試劑盒經(jīng)化學(xué)改進(jìn)，可用于檢測(cè)聚丙烯酰胺和瓊脂糖基質(zhì)上的蛋白和核酸。
銀染Plus 試劑盒的特點(diǎn)：
??檢測(cè)納克級(jí)蛋白和核算
??防止凝膠基質(zhì)上中的銀沉淀從而消除背景
??只需3 個(gè)步驟：固定，清洗和染色能染色40 塊小膠和13 塊大膠
熒光染料
Oriole 熒光凝膠染料
Oriole 熒光凝膠染料是一種即用，快速，靈敏和高線性的蛋白凝膠染料，可用來(lái)對(duì)SDS-PAGE 凝膠上的蛋白進(jìn)行檢測(cè)和定量。無(wú)需固定，只需要一個(gè)步驟即可進(jìn)行染色。因?yàn)闊o(wú)需脫色，蛋白樣品可在2 小時(shí)之內(nèi)進(jìn)行準(zhǔn)確檢測(cè)和定量。
??快速熒光凝膠染色；包括成像，全過(guò)程不超過(guò)2 小時(shí)
??與隨后的蛋白酶解及質(zhì)譜分析*兼容
??納克級(jí)靈敏度和低背景
??動(dòng)態(tài)范圍寬（3 個(gè)數(shù)量級(jí)）
SYPRO Ruby 蛋白凝膠染料
該染料是雙向電泳中使用zui廣泛的染料。SYPRO Ruby 蛋白凝膠染料與質(zhì)譜分析和以Edman 為基礎(chǔ)的測(cè)序兼容。優(yōu)點(diǎn)包括：
l zui低靈敏度范圍為1-10ng
l 檢測(cè)糖蛋白、脂蛋白和金屬蛋白
l 不受樣品中外源核酸的干擾
l IEF 凝膠的理想選擇
Flamingo 熒光凝膠染料
Flamingo 熒光染料是一個(gè)10×儲(chǔ)存液，內(nèi)含一種與變性蛋白質(zhì)結(jié)合后就會(huì)發(fā)光的熒光染料。這種易用的熒光染料可配合激光為激發(fā)光源的的掃描儀應(yīng)用于1-D 和2-D 蛋白質(zhì)電泳分析。染色只需2 步，在5 小時(shí)內(nèi)即可完成整個(gè)染色步驟。無(wú)需脫色并具有靈活的染色時(shí)間。染過(guò)的膠在2-8℃，暗處可保存6 個(gè)月而不會(huì)丟失圖像信號(hào)。Flamingo 染料可與質(zhì)譜分析和以Edman 為基礎(chǔ)的測(cè)序相兼容。使用Flamingo 熒光凝膠染料染色的凝膠可以使用各種熒光成像系統(tǒng)成像。
??檢測(cè)的zui低靈敏度可以達(dá)到0.25-0.5ng
??線性可達(dá)0.5ng-1ug
??可用于IEF 膠染色
負(fù)染色劑
Bio-Rad 的負(fù)染色劑是基于凝膠上的金屬離子的選擇性沉淀，而蛋白帶不被染色和修飾。因?yàn)榈鞍撞槐恍揎?，所以該沉淀方?兼容隨后的應(yīng)用，如質(zhì)樸分析。Bio-Rad為聚丙烯酰胺凝膠提供兩種類(lèi)型的負(fù)染色試劑。兩種染料的靈敏度都比考馬斯亮藍(lán)R-250 高。
鋅染色劑和脫色試劑盒
鋅染色劑和脫色試劑盒源于Fernandez-Patron 等（1992）的方法，是一種用于聚丙烯酰胺凝膠的可逆負(fù)染色劑。簡(jiǎn)單的三步驟使您在15 分鐘內(nèi)看到負(fù)染條帶。凝膠的白色背景在黑色背景下產(chǎn)生對(duì)比強(qiáng)烈的清晰條帶。凝膠在15 分鐘內(nèi)*脫色，用于Western 雜交、氨基酸分析和N-端測(cè)序。
銅染色劑和脫色試劑盒
Bio-Rad 的銅染色劑和脫色試劑盒源于Lee et al.（1987）的方法，只需10分鐘就能看到SDS-PAGE 上的蛋白條帶。由于蛋白是負(fù)染，如果不進(jìn)行蛋白洗脫和轉(zhuǎn)印，則不需要脫色步驟。
交聯(lián)劑和催化劑