詳細介紹
蛋白印跡(Western Blot)
產(chǎn)品簡介:
印跡膜
Blotting Membranes
一、硝酸纖維膜
Bio-Rad 的硝酸纖維膜能產(chǎn)生*的結(jié)果,處理和保存更為簡單。它不含纖維和樹脂載體,是純凈的致密硝酸纖維,一種已經(jīng)驗證可應用于Western、Northern和Southern印跡雜交的介質(zhì)。這類硝酸纖維膜沒有普通硝酸纖維常見的脆性。
孔徑為0.45μm的硝酸纖維膜推薦用于大多數(shù)分析型轉(zhuǎn)印,包括蛋白ssDNA和RNA轉(zhuǎn)移。0.2μm的硝酸纖維膜可用于轉(zhuǎn)移小分子量蛋白(<15kD)或核酸。能避免由于膜轉(zhuǎn)移而導致的樣品損失。
Bio-Rad 的硝酸纖維素膜有卷狀形式,裁剪成適合凝膠尺寸的片狀形式和剪裁方便使用的濾紙/膜三明治形式。
載體硝酸纖維膜
載體硝酸纖維膜由*純硝酸纖維在惰性合成載體上鋪制而成,是用于核酸和蛋白的固相載體,能反復標記和高壓滅菌(121?C)。
二、PVDF 膜
具化學抗性的 PVDF 膜用于蛋白研究,用于 Edman降解(N-端)測序。由于 PVDF 膜有很高的蛋白結(jié)合能力,而且在多次洗脫和重新雜交后仍能避免撕裂和脆裂,長期以來它一直作為 western 印跡雜交膜。Bio-Rad 為用戶提供了特別為蛋白測序和轉(zhuǎn)印設(shè)計的 PVDF 膜。所有 Bio-RadPVDF 膜的孔徑均為0.2μm。
用于 Western 雜交的 Immun-Blot® PVDF 膜
Immun-Blot PVDF 膜能強有力地保留靶蛋白,并減少影響高靈敏度檢測的非特異性蛋白結(jié)合,使它成為化學發(fā)光和比色 Western 雜交的理想選擇,載量為 150-160μg/cm2。
用于蛋白測序的 Sequi-Blot™ PVDF 膜
Sequi-Blot PVDF 膜具有突出的蛋白測序能力。它具有的結(jié)合載量甚至可測序低豐度蛋白。Sequi-Blot PVDF 膜能保留所有轉(zhuǎn)移的蛋白,而其它品牌的 PVDF 膜會使大量蛋白在轉(zhuǎn)膜過程中損失,載量為170–200μg/cm2。
低熒光 PVDF 膜
Bio-Rad 底熒光 PVDF 膜是熒光應用的理想選擇。膜的低熒光特點使圖像品質(zhì)更好并提高了所有熒光檢測的靈敏度,該膜適用于多重熒光 western 轉(zhuǎn)印和化學應用,該膜以 PVDF/ 濾紙三明治形式供應。
轉(zhuǎn)印濾紙
Bio-Rad 提供了一系列適用于轉(zhuǎn)印的濾紙,包括適合于標準膠大小的預切濾紙。
印跡膜檢測
Detection on Blots
一、化學發(fā)光和以感光片為基礎(chǔ)的檢測
Chemiluminescence and Film-Based Detection
Immun-Star WesternC 化學發(fā)光試劑盒
Immun-Star WesternC 化學發(fā)光檢測試劑盒與 Precision Plus Protein™ WesternC 蛋白標準品及高靈敏化學發(fā)光成像系統(tǒng)ChemiDoc™ 配合使用效果更佳。Immun-Star WesternC化學發(fā)光底物可持續(xù)光信號24小時,因此用戶可以進行多次曝光,得到高質(zhì)量的印跡。
特點包括:
■■ 信號持續(xù)時間長,半衰期長——允許對印記進行多次成像
■■ 飛克級的高靈敏度
■■ 室溫保存期 12 個月
■■ 立即產(chǎn)生強烈信號,便于使用 CCD 成像系統(tǒng)檢測
Immun-Star WesternC 化學發(fā)光檢測試劑盒可適用于任何與 HRP 偶聯(lián)的二抗。
Immun-Star HRP 化學發(fā)光試劑盒
Immun-Star HRP 檢測系統(tǒng)含有 HRP 結(jié)合的二抗。過氧化物酶催化的Luminol增強劑加強信號輸出,能檢測到低皮克級的靶蛋白并把信號持續(xù)時間提高到6-8小時。印跡膜可多次洗脫和再雜交。Immun-Star HRP 試劑盒是替代同位素檢測的一個高度靈敏的快速方法,Immun-Star HRP檢測系統(tǒng)有多種包裝形式,以滿足您的實驗需求。Immun-Star HRP 特性包括:
■■ 工作溶液在室溫下保持 24 小時穩(wěn)定
■■ 曝光時間短 ( ~30 秒 )
■■ 檢測靈敏度 1-3 pg 的蛋白質(zhì)
提供山羊抗小鼠或山羊抗兔偶聯(lián)物兩種試劑盒。
Immun-Star AP 化學發(fā)光試劑盒
Immun-Star AP 檢測系統(tǒng)采用 AP 偶聯(lián)的二級抗體,試劑盒將 Bio-Rad 轉(zhuǎn)印試劑和技術(shù)與 CDP-Star 化學發(fā)光技術(shù)結(jié)合起來,zui初激活后,光信號可持續(xù) 24 小時,使數(shù)據(jù)獲取具有靈活性,典型的膠片曝光時間由樣品量和抗體特異性而定,一般為30秒到5分鐘。Immun-Star AP 檢測系統(tǒng)為您的實驗提供各種包裝形式,Immun-Star AP 其它特性包括:
■■ 幾個星期后,雜交印跡仍可通過加入新鮮化學發(fā)光底物而再活化
■■ 能檢測10pg蛋白,靈敏度可與放射性方法相媲美
■■ 可以洗脫和重新雜交
提供山羊抗小鼠或山羊抗兔偶聯(lián)物兩種試劑盒。
二、比色檢測
Colorimetric Detection
(一)HRP比色檢測
Opti-4CN 底物和檢測試劑盒
4CN 檢測靈敏度約為500 pg 抗原,并具有背景很低的優(yōu)點。Bio-Rad Opti-4CN 試劑盒的檢測靈敏度超過了4CN,達到 100 pg,無需附加步驟。
信號放大Opti-4CN底物和檢測試劑盒
信號放大 Opti-4 CN 檢測試劑盒以Bio-Rad HRP 活化信號放大試劑為基礎(chǔ),試劑盒檢測靈敏度達5 pg,達到甚至超過放射性或化學發(fā)光檢測,節(jié)省了暗室顯色等的時間和費用,無需另加材料或特殊設(shè)備。
Immun-Blot® HRP 檢測試劑盒
Immun-Blot HRP 檢測試劑盒提供標準 HRP/4CN 比色檢測 Western 印跡雜交膜所需的試劑,而且預混合緩沖液和酶底物使用更方便,試劑盒的所有組分都通過獨立的印跡雜交質(zhì)控測試。
預混合及獨立包裝的 HRP 比色底物
預混合酶底物試劑盒使用簡便、可靠,并能減少 Western印跡膜顯色過程中有害試劑的接觸。
(二)AP 比色檢測
Immun-Blot® 比色檢測試劑盒
以 AP 偶聯(lián)二級抗體為基礎(chǔ),Western 印跡雜交比色檢測的常用底物為5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸/氮藍四唑( BCIP/NBT )。Immun-Blot 檢測試劑盒提供AP和BCIP-NBT比色檢測所需的主要試劑,以及使用方便的預混合緩沖液和酶底物,試劑盒的所有組份都經(jīng)過單獨的印跡雜交質(zhì)控測試。
預混合及獨立包裝的 AP 比色底物
預混合酶底物試劑盒使用簡便、可靠,并能減少有害試劑的接觸。
三、印跡級偶聯(lián)物和試劑
Blotting-Grade Conjugates and Reagents
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