TissueLyser II自動(dòng)化樣品破碎通過(guò)不銹鋼珠、碳化鎢珠或玻璃珠在塑料樣品管中的高速震動(dòng)，可同步破碎多個(gè)生物樣本。借助適當(dāng)?shù)倪m配器，可同時(shí)處理48或192個(gè)樣本。也可使用研磨罐處理大體積樣本。同時(shí)提供各種研磨珠、研磨珠分配器、收集管及管蓋。

TissueLyser II自動(dòng)化樣品破碎

用于中到高通量樣本破碎，適用于分子分析

• 破碎過(guò)程便利、安全
• 適配器專為高通量破碎而優(yōu)化
• 提供多種配件
• 確保難裂解組織獲得高重復(fù)性結(jié)果
• QIAGEN樣本處理體系的重要組成部分

通過(guò)不銹鋼珠、碳化鎢珠或玻璃珠在塑料樣品管中的高速震動(dòng)，TissueLyser II可同步破碎多個(gè)生物樣本。借助適當(dāng)?shù)倪m配器，可同時(shí)處理48或192個(gè)樣本。也可使用研磨罐處理大體積樣本。同時(shí)提供各種研磨珠、研磨珠分配器、收集管及管蓋。TissueLyser II包括適配器在內(nèi)的所有配件與TissueLyser（已停產(chǎn)）兼容。

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可靠檢測(cè)miRNA。

將大鼠腎臟置于RNAlater RNA Stabilization Reagent中穩(wěn)定，使用TissueLyser II，在QIAzol Lysis Reagent中25 Hz破碎25 mg樣本2 x 5分鐘。使用miRNeasy Mini Kit，采用手動(dòng)步驟 (Manual) 或在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀 (QIAcube) 上進(jìn)行自動(dòng)化處理，純化包含miRNA的總RNA。使用miScript System進(jìn)行Real-time RT-PCR，檢測(cè)2種不同的miRNA——miR-16和miR-25。

高效破碎動(dòng)物組織。

冷凍 (Frozen) 組織 (20 mg) 或?qū)⑵渲糜赗NAlater RNA Stabilization Reagent (RNAlater) 中穩(wěn)定，然后使用TissueLyser II破碎 (肝臟和肌肉破碎2 x 2分鐘；皮膚破碎2 x 5分鐘)。使用RNeasy Mini Kit (肝臟)、RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (皮膚) 或RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (肌肉) 純化RNA。[A] 采用1.2 %的甲醛瓊脂糖凝膠分析顯示了清晰的核糖體RNA條帶，表示具有完整的RNA。[B] 利用A₂₆₀ nm吸光度測(cè)量，定量RNA產(chǎn)量。

 

 

從植物組織中純化RNA具有可重復(fù)性。

使用TissueLyser II破碎冷凍的植物葉子 (2 x 1分鐘)。使用RNeasy Plant Mini Kit純化RNA，并在1.2 %的甲醛瓊脂糖凝膠上進(jìn)行分析。核糖體RNA條帶清晰均勻，表示可重復(fù)純化出完整的RNA。T：番茄 (100 mg)；A：擬南芥 (25 mg)；C：棉花 (100 mg)；M：玉米 (100 mg)；R：油菜 (100 mg)。

 

 

從動(dòng)物組織中純化DNA，具有可重復(fù)性。

將一只大鼠的心臟切成96 x 25 mg的小塊，然后使用TissueLyser II破碎 (2 x 15秒)。在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上使用DNeasy Blood & Tissue Kit (采用Reagent DXzui大程度減少裂解起泡現(xiàn)象) 進(jìn)行自動(dòng)DNA純化。48個(gè)樣本的瓊脂糖凝膠分析顯示了各樣本中的DNA量*。M：分子量標(biāo)準(zhǔn)。

 

 

從動(dòng)物組織中純化完整的蛋白。

將組織樣本(50 mg) 置于Mammalian Cell Lysis Buffer中預(yù)冷至4°C，使用TissueLyser II 20 Hz破碎3 x 90秒。使用針對(duì)∝-tubulin、β-actin和GAPDH的抗體對(duì)裂解物 (15 μg) 進(jìn)行western印跡分析。同時(shí)分析純化的蛋白質(zhì) (1 μg、100 ng和10 ng)，作為陽(yáng)性對(duì)照。Lu：肺；He：心臟；Sp：脾；Li；肝；Ki：腎；Br：腦；Th：胸腺。

 

 

從革蘭氏陽(yáng)性菌中純化RNA，具有可重復(fù)性。

使用RNAprotect Bacteria Reagent穩(wěn)定B. subtilis培養(yǎng)物。使用TissueLyser II，在裂解緩沖液中30 Hz破碎單個(gè)樣本 (各2.5 x 10⁸個(gè)細(xì)胞) 5分鐘。使用RNeasy Protect Bacteria Mini Kit純化總RNA，并在甲醛瓊脂糖凝膠上進(jìn)行分析。

 

 

TissueLyser II.

 

 

Performance

TissueLyser II尤其適合高通量的樣本破碎，適用于人類、動(dòng)物和植物組織、細(xì)菌和酵母?？杉兓@得高品質(zhì)的DNA、RNA、miRNA和蛋白質(zhì)，甚至對(duì)于難裂解的組織也具有高度的可重復(fù)性（參見(jiàn)"Efficient disruption of animal tissues"、"Reproducible RNA purification from plant tissues"、"Reproducible DNA purification from animal tissue"、"Purification of intact protein from animal tissue"、"Reproducible RNA purification from Gram-positive bacteria"和"Reliable detection of miRNAs"）。

 

 

Principle

基因分型、基因表達(dá)分析和蛋白質(zhì)組學(xué)研究均要求對(duì)生物樣本進(jìn)行高效破碎，以確保獲得高產(chǎn)的DNA、RNA和蛋白質(zhì)。TissueLyser II體系通過(guò)研磨珠的高速震蕩來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本的有效破碎。TissueLyser II可快速、*的破碎樣本，*釋放生物分子，并可同時(shí)對(duì)樣本進(jìn)行勻，協(xié)助后續(xù)使用的QIAGEN試劑盒進(jìn)行純化（參見(jiàn)"QIAGEN purification kits compatible with QIAGEN disruption systems"）。

QIAGEN提供從樣本收集到DNA、RNA和蛋白質(zhì)純化的完整解決方案，TissueLyser II是其中關(guān)鍵的組成部分。TissueLyser II可作為QIAsymphony SP等QIAGEN自動(dòng)化儀器高通量制備和分析樣本的補(bǔ)充（參見(jiàn)"QIAGEN high-throughput automation"）。這一即用型儀器可從1–96個(gè)樣本中自動(dòng)純化DNA、RNA和蛋白質(zhì)。TissueLyser II也適用于QIAGEN手動(dòng)樣本制備試劑盒（參見(jiàn)"QIAGEN purification kits compatible with QIAGEN disruption systems"）。

進(jìn)行RNA研究時(shí)，新鮮收集的組織可在RNAlater RNA Stabilization Reagent中穩(wěn)定，可有效避免操作過(guò)程中RNA的降解。對(duì)于需要純化DNA、 RNA和蛋白質(zhì)的應(yīng)用，可使用Allprotect Tissue Reagent，將新鮮收集的組織中的待分析物迅速穩(wěn)定。

QIAGEN高通量自動(dòng)化儀器 >

儀器	目的	通量
QIAsymphony SP核酸提取純化分析儀	純化DNA、RNA和蛋白質(zhì)	每批1–96個(gè)樣本
BioRobot Universal System	純化DNA和RNA	96孔板
QIAxcel	對(duì)DNA片段和RNA進(jìn)行電泳分析	每批多達(dá)96個(gè)樣本
QIAgility	反應(yīng)體系構(gòu)建	每批多達(dá)384個(gè)樣本
Rotor-Gene Q實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析儀	real-time PCR和HRM分析	每批多達(dá)100個(gè)樣本
PyroMark Q96 MD or ID	甲基化和突變分析	每批多達(dá)96個(gè)樣本

與QIAGEN破碎儀器兼容的QIAGEN純化試劑盒

純化的被分析物	樣本類型	QIAGEN試劑盒
RNA	容易裂解的組織	RNeasy Kits
		RNeasy Plus Kits
		RNeasy Protect Kits
RNA	富含纖維的組織	RNeasy Fibrous Tissue Kits
RNA	各種類型組織	RNeasy Lipid Tissue Kits
		RNeasy Universal Tissue Kits
RNA	植物組織	RNeasy Plant Mini Kit
RNA	酵母	RNeasy Kits
RNA	細(xì)菌	RNeasy Protect Bacteria Kits
microRNA	各種類型組織	miRNeasy Kits
DNA	人類組織	QIAamp DNA Kits
DNA	動(dòng)物組織	DNeasy Blood & Tissue Kits
蛋白質(zhì)	組織	Qproteome Mammalian Protein Prep Kit
磷蛋白	組織	PhosphoProtein Purification Kit
糖蛋白	組織	Qproteome Glycoprotein Kits
DNA和RNA	組織	AllPrep DNA/RNA Kits
DNA、RNA和蛋白質(zhì)	組織	AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit

 

 

Procedure

TissueLyser Adapter Sets使用微型收集管，可處理多達(dá)2 x 96個(gè)樣本，或使用2 ml微型離心管，處理多達(dá)2 x 24個(gè)樣本。如果在樣本破碎過(guò)程中不使用裂解緩沖液，則需要將適配器置于–80°C環(huán)境中預(yù)冷。在破碎時(shí)樣品管需保持密封，以避免交叉污染，這對(duì)于real-time RT-PCR或芯片分析等高敏感性的下游應(yīng)用尤其重要。根據(jù)樣本類型不同，破碎使用不銹鋼珠、碳化鎢珠或玻璃珠進(jìn)行。TissueLyser Bead Dispensers用來(lái)方便的將單個(gè)珠子加入到離心管中，或同時(shí)將96個(gè)研磨珠加入到收集管中。TissueLyser II也可配合Grinding Jar Sets使用，破碎大體積樣本。

 

 

Applications

TissueLyser II自動(dòng)化樣品破碎每批可處理多達(dá)192個(gè)樣本，因此是遺傳學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)研究中獲得生物信息的理想解決方案。TissueLyser II是新一代高通量測(cè)序的shou選破碎儀器。TissueLyser II可與多種QIAGEN樣本純化試劑盒配套使用，樣本純化可以手動(dòng)進(jìn)行，也可以在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀、QIAsymphony SP核酸提取純化分析儀、EZ1 Advanced、BioRobot或BioSprint工作站上自動(dòng)進(jìn)行。