嘌呤霉素?zé)o菌溶液
MCE 國際站：Puromycin, Sterile
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件： -20°C 保存 2 年
簡介：MCE Puromycin, Sterile 來源于白黑鏈霉菌（Streptomyces alboniger），是一種氨基糖苷類抗生素，可以通過抑制蛋白質(zhì)合成從而殺死多數(shù)革蘭氏陽性菌及各種動物或昆蟲細(xì)胞，在某種特殊情況下也可有效作用于大腸桿菌。
概述：MCE 即用型嘌呤霉素?zé)o菌溶液，已過濾除菌，可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。嘌呤霉素來源于白黑鏈霉菌（Streptomyces alboniger），是一種氨基糖苷類抗生素，可以通過抑制蛋白質(zhì)合成從而殺死多數(shù)革蘭氏陽性菌及各種動物或昆蟲細(xì)胞，在某種特殊情況下也可有效作用于大腸桿菌。嘌呤霉素被廣泛用作哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中的篩選抗生素。其抗性來自于嘌呤霉素產(chǎn)生（Streptomyces alboniger）內(nèi)發(fā)現(xiàn)的 pac 基因，將此基因?qū)爰?xì)胞可使細(xì)胞獲得嘌呤霉素抗性，從而用于篩選和維持培養(yǎng)攜帶 pac 基因的哺乳動物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。在某些特定情況下，也可以用來篩選表達(dá)pac 基因的大腸桿菌菌株。
描述：
嘌呤霉素是一種由白黑鏈霉菌產(chǎn)生的氨基核苷類抗生素。它通過破壞核糖體上的肽轉(zhuǎn)移來抑制蛋白質(zhì)合成，導(dǎo)致翻譯過程中的鏈過早終止。它可以殺死大多數(shù)革蘭氏陽性細(xì)菌和各種動物或昆蟲細(xì)胞。
對嘌呤霉素的抗性是由白黑鏈霉菌中的嘌呤霉素 N-乙酰轉(zhuǎn)移酶基因 (pac) 賦予的。因此，嘌呤霉素是一種流行且有效的抗生素，用于在哺乳動物細(xì)胞系和大腸桿菌中選擇帶有 pac 基因的載體。
操作說明：1. 嘌呤霉素溶液的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長條件和細(xì)胞代謝率而適當(dāng)調(diào)整。2. 對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），來確定最佳篩選濃度：1）以 20-25% 的細(xì)胞密度鋪板，鋪足夠量的孔以進(jìn)行后續(xù)的梯度實驗，37℃孵育過夜。2）準(zhǔn)備含梯度濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基為篩選培養(yǎng)基，至少 5 個梯度。3）細(xì)胞過夜培養(yǎng)后，使用上述配制的篩選培養(yǎng)基替換舊培養(yǎng)基，孵育細(xì)胞。每個濃度做 3 個平行對照。4）約 2-3 天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。5）每日監(jiān)測細(xì)胞，觀察活細(xì)胞比例。通常 7-10 天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的低濃度為篩選用的工作濃度。
注意事項：1. 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免效價降低。2. 注意無菌操作，避免污染。3. 本產(chǎn)品的工作濃度是針對含血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基而設(shè)定的，在無血清培養(yǎng)基中使用時應(yīng)適當(dāng)減少用量，以免造成細(xì)胞毒性。4. 本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療。6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
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