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          目錄:廈門逸漠生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>人原代細(xì)胞>> 人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞

          人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞
          • 人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞
          • 人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞
          參考價(jià) 8850
          訂貨量 ≥1
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          8850
          ≥1
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 IMMOCELL
          • 型號(hào)
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 廈門市
          屬性

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          更新時(shí)間:2024-02-27 15:03:32瀏覽次數(shù):250評(píng)價(jià)

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          供貨周期 一個(gè)月 規(guī)格 5x10*5cells/T25
          貨號(hào) IMP-H056
          人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞,提供免疫鑒定報(bào)告,出庫(kù)附COA質(zhì)檢報(bào)告,確保無(wú)支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等,現(xiàn)貨供應(yīng),技術(shù)人員全程一對(duì)一指導(dǎo),售后無(wú)憂,與多家科研機(jī)構(gòu)高校合作

          人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞

          產(chǎn)品基本信息

          細(xì)胞名稱:人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞

          組織來(lái)源:關(guān)節(jié)滑膜組織

          細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

          生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

          培養(yǎng)基::專用培養(yǎng)基

          生長(zhǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

          傳代方法:1:2至1:3,每周 3次

          凍存條件:無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

          支原體檢測(cè):無(wú)

          細(xì)胞培養(yǎng)操作

          1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

          2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

          b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

          c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

          3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;

          a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

          b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

          c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          培養(yǎng)注意事項(xiàng)

          1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

          2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

          3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。

          4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

          5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

          6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

          7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

          8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

          9. 注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。


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