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          目錄:廈門逸漠生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>小鼠原代細(xì)胞>> 小鼠淋巴管成纖維細(xì)胞

          小鼠淋巴管成纖維細(xì)胞
          • 小鼠淋巴管成纖維細(xì)胞
          • 小鼠淋巴管成纖維細(xì)胞
          參考價 4050
          訂貨量 ≥1
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          4050
          ≥1
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 IMMOCELL
          • 型號
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 廈門市
          屬性

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          更新時間:2024-02-26 08:44:10瀏覽次數(shù):204評價

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          供貨周期 一個月 規(guī)格 5x10*5cells/T25
          貨號 IMP-M110
          小鼠淋巴管成纖維細(xì)胞,提供免疫鑒定報告,出庫附COA質(zhì)檢報告,確保無支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等,現(xiàn)貨供應(yīng),技術(shù)人員全程一對一指導(dǎo),售后無憂,與多家科研機(jī)構(gòu)高校合作

          小鼠淋巴管成纖維細(xì)胞

          產(chǎn)品基本信息

          細(xì)胞名稱:小鼠淋巴管成纖維細(xì)胞

          種屬來源:小鼠

          組織來源:淋巴管

          細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

          生長特性:貼壁生長

          培養(yǎng)基::專用培養(yǎng)基

          生長條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

          傳代方法:1:2至1:3,每周 3次

          凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存

          支原體檢測:無

          細(xì)胞培養(yǎng)操作

          1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心5 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

          2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

          b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

          c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

          3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;

          a、收集細(xì)胞,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

          b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。

          c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          培養(yǎng)注意事項(xiàng)

          1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

          2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

          3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。

          4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

          5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

          6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

          7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

          8. 備注:為防止回收培養(yǎng)基時操作造成污染,運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)建議不再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后傳代建議1:2傳代 。

          9. 注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。



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