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貨物所在地:北京北京市
更新時(shí)間:2023-11-28 09:58:53
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12% SDS-PAGE快速制膠試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):P1250M
儲(chǔ)存條件:4oC保存,需避光。APS促凝劑 -20oC保存半年內(nèi)有效。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
LABLEAD12% SDS-PAGE快速制膠試劑盒提供了簡(jiǎn)單快速地配制12% SDS-PAGE凝膠所需的所有試劑,客戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制12% SDS-PAGE凝膠。LABLEAD SDS-PAGE快速制膠試劑盒系列產(chǎn)品有6%、8%、10%、12%和15%共5種常見濃度供選擇。本試劑盒把SDS-PAGE凝膠配制所需的Tric-HCl 、Acr-Bis(29:1) 、SDS等預(yù)混合成分離膠預(yù)混液和濃縮膠預(yù)混液,使用前僅需加入適量10% APS和TEMED即可簡(jiǎn)單快速地完成分離膠和濃縮膠的配制。本試劑盒約可配制約100塊常規(guī)大小的12% SDS-PAGE凝膠。具體可以配制的凝膠數(shù)量和凝膠的厚薄以及凝膠的大小有關(guān)。
產(chǎn)品組分:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
P1250M- 1 | 12% SDS-PAGE分離膠預(yù)混液 | 250ml |
P1250M-2 | SDS-PAGE濃縮膠預(yù)混液 | 120ml |
P1250M-3 | APS促凝劑 | 5ml |
P1250M-4 | TEMED | 0.5ml |
注意事項(xiàng):
1、APS促凝劑應(yīng)于-20oC保存。推薦APS分裝后保存。
2、分離膠預(yù)混液和濃縮膠預(yù)混液中含有Acr-Bis,對(duì)人體有毒,請(qǐng)做好防護(hù)。
3、TEMED易揮發(fā),使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。另,凝膠凝聚的速度和溫度及光照關(guān)系密切,可通過適當(dāng)調(diào)節(jié)APS和TEMED的用量,控制在不同的室內(nèi)環(huán)境下凝膠凝聚的速度。
4、TEMED易燃,有腐蝕性,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或腐蝕其他物品。
5、本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
6、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作步驟:
1. 根據(jù)目的蛋白的分子量大小選擇合適濃度的SDS-PAGE分離膠(即分離膠)。 不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離范圍如下(僅供參考):
SDS-PAGE分離膠濃度 | 最佳分離范圍 |
6%膠 | 50- 150kD |
8%膠 | 30-90kD |
10%膠 | 20-80kD |
12%膠 | 12-60kD |
15%膠 | 10-40kD |
2. 參考下表,按照1%的比例加入相應(yīng)的APS促凝劑,按照0.04%的比例加入相應(yīng)量的TEMED 。例如10ml 12% SDS-PAGE分離膠預(yù)混液中,加入100μl APS促凝劑和4μl TEMED。適當(dāng)混勻后倒入到制膠模具中,用乙醇或蒸餾水封住液面,直至分離膠凝固充分。通常10-30分鐘內(nèi)膠會(huì)凝固。
注:具體凝固時(shí)間和溫度及光照有關(guān),為達(dá)到較好的凝固效果,當(dāng)室溫較低時(shí),可以適當(dāng)同時(shí)加大10% APS 和TEMED的用量,例如20oC時(shí)建議用量是正常推薦用量的1.5倍,15oC時(shí)建議用量是正常推薦用量的2倍。
成分 | 配制不同體積 SDS-PAGE 分離膠所需各成分的體積 | |||||
12% SDS-PAGE 分離膠預(yù)混液 | 5 ml | 10 ml | 15 ml | 20 ml | 30 ml | 50 ml |
APS 促凝劑 | 0.05 ml | 0.1 ml | 0.15 ml | 0.2 ml | 0.3 ml | 0.5 ml |
TEMED | 2 ul | 4 ul | 6 ul | 8 ul | 12 ul | 20 ul |
3. 參考下表,分離膠凝固后,在SDS-PAGE濃縮膠預(yù)混液中,按照1%的比例加入相應(yīng)量的10% APS溶液,按照 0.1%的比例加入相應(yīng)量的TEMED。例如10ml SDS-PAGE濃縮膠預(yù)混液中,加入100μl APS促凝劑和10μl TEMED,適當(dāng)混勻。去除分離膠上面覆蓋的液體,盡量去干凈,然后倒入添加了APS促凝劑和TEMED的 SDS-PAGE濃縮膠預(yù)混液,插入梳子待凝固。濃縮膠凝固后即可用于后續(xù)的電泳。
成分 | 配制不同體積 SDS-PAGE 濃縮膠所需各成分的體積 | |||||
SDS-PAGE 濃縮膠預(yù)混液 | 2 ml | 3 ml | 4 ml | 6 ml | 8 ml | 10 ml |
APS 促凝劑 | 0.02 ml | 0.03 ml | 0.04 ml | 0.06 ml | 0.08 ml | 0.1 ml |
TEMED | 2 ul | 3 ul | 4 ul | 6 ul | 8 ul | 10 ul |
4. 如配制好的凝膠如果當(dāng)天不使用,可在4oC保存1-2天后使用。
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