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體內mRNA轉染試劑——PolyTool™ mRNA Transfection Reagent in vivo,專用于體內mRNA遞送,脾臟靶向能力優(yōu)yue,誘導的體液和細胞免疫強烈。特別的是,通過肺部給藥,其在肺部表達高效。
一、實驗操作流程
1.載mRNA納米顆粒的制備
取兩個無菌無酶1.5 mL離心管,其中一個離心管加入5 μL 1 mg/mL的Luc mRNA,并用5 %的葡萄糖溶液補至100 μL,混勻;另一個離心管加入25 μL 1 mg/mL的 PolyTool™ mRNA Transfection Reagent in vivo并用
5 %的葡萄糖溶液補至100 μL,混勻;將兩個離心管中的溶液快速混合到一起,渦旋10 s,靜置10 min 即可得到200 μL載mRNA納米顆粒溶液。
2.載mRNA納米顆粒的體內給藥
將得到的200 μL納米顆粒吸入1 mL胰dao素注射器中,在C57BL/6小鼠的大腿內側進行肌肉、靜脈或肺部gei藥(肺部gei藥最多40 μL)注射。注射完畢后確定小鼠無異常后將小鼠放回籠中。
3.活體成像檢測Luc mRNA的表達
在肌肉注射納米顆粒6 h,12 h,24 h,48 h,72 h后通過Perkin Elmer的Lumina II或Lumina III評價材料的體內轉染性能。應提前對小鼠的成像部位進行剃毛,并配置熒光素鉀鹽溶液備用(每只鼠3 mg,溶于200 μL PBS溶液中,現(xiàn)配現(xiàn)用)。將熒光素鉀鹽溶液通過腹腔注射給小鼠,靜置5-10 min后進行活體成像。采用生物發(fā)光模式,曝光時間為60 s,可采用連續(xù)拍攝模式,每間隔1 min拍攝一次,直到獲取最大的發(fā)光值。
活體成像結果如下圖所示:
使用PolyToolTM mRNA Transfection Reagent in vivo體液免疫結果如下圖所示:
使用PolyToolTM mRNA Transfection Reagent in vivo細胞免疫結果如下圖所示:
二、產品優(yōu)勢
優(yōu)秀的轉染效率:體內mRNA遞送,表現(xiàn)出優(yōu)xiu的轉染效率,特別是脾臟靶向能力you越。
細胞毒性低:作用溫和,能更好的實現(xiàn)高轉染效率與低細胞毒性之間的平衡。
操作簡單:只需4步,無需換液,快速簡便增加。
體內mRNA轉染試劑中科百抗PolyTool™ mRNA Transfection Reagent in vivo代理——天津益元利康生物科技有限公司,成立于2018年,坐落于天津經濟技術開發(fā)區(qū)。公司產品線涉及細胞與基因治療、免疫學、分子生物學、細胞生物學等多個方向,專注于生命科學試劑、耗材、細胞、儀器等產品銷售,經營的品牌主要有:ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam等等。我們提供質優(yōu)價美的產品、及時到位的服務,努力成長為生命科學和生物技術企業(yè)的優(yōu)質供應商。