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碧云天Lipo8000轉(zhuǎn)染試劑介紹:
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑(Lipo8000™ Transfection Reagent)是碧云天最新研發(fā)的一種以納米材料為基礎(chǔ)的最bian jie的高效細胞轉(zhuǎn)染試劑,達到甚至超過了國際主流轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效果,并且轉(zhuǎn)染過程無須任何孵育時間,實現(xiàn)了細胞轉(zhuǎn)染的至簡操作。適用于把質(zhì)粒、siRNA或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸、以及核酸蛋白復(fù)合物或帶負電荷的蛋白轉(zhuǎn)染到真核細胞中,也可以用于活體動物的核酸轉(zhuǎn)染以及用于基因治療。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑的納米技術(shù)可保證其瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染時的可靠性和穩(wěn)定性。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑使用特別便捷,無血清培養(yǎng)液和核酸及轉(zhuǎn)染試劑可以直接混勻,質(zhì)粒轉(zhuǎn)染無需任何孵育時間,即可直接加入到細胞培養(yǎng)器皿內(nèi),實現(xiàn)了細胞轉(zhuǎn)染的至簡操作。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑對于常見的哺乳動物細胞具有非常高的轉(zhuǎn)染效率、重復(fù)性好、操作簡單、通常觀察不到細胞毒性,對于貼壁細胞和懸浮細胞都適用,特別適用于難轉(zhuǎn)染的貼壁細胞。Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑由于幾乎wan quan沒有細胞毒性,從而在轉(zhuǎn)染后無需進行細胞培養(yǎng)液的更換,在轉(zhuǎn)染24-48小時后直接收集細胞進行蛋白表達鑒定即可。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑經(jīng)過對小鼠胚胎成纖維細胞NIH3T3、人胚胎腎細胞HEK293/HEK293T、宮頸癌細胞Hela、結(jié)腸癌細胞HCT116、肝細胞HepG2和肺癌細胞A549等多種細胞的測試,轉(zhuǎn)染效率和Thermo公司的Lipofectamine® 3000 Transfection Reagent、Promega公司的ViaFect™ Transfection Reagent相當,在一些細胞中甚至比Lipofectamine® 3000和ViaFect™的轉(zhuǎn)染效率更高。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑不僅適用于質(zhì)粒、siRNA等單一成分的細胞轉(zhuǎn)染,也適合多個質(zhì)?;蛘哔|(zhì)粒與siRNA等的組合轉(zhuǎn)染。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染過表達質(zhì)粒后,通常24-48小時后達到較高的蛋白表達水平,并且很多情況下蛋白表達量在轉(zhuǎn)染后48小時顯著高于轉(zhuǎn)染后24小時;轉(zhuǎn)染siRNA通常3-5天后對于目的基因的下調(diào)水平會比較理想。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染細胞時,不受培養(yǎng)液中的血清和抗生素的影響,即可以在血清和抗生素存在的情況下進行細胞轉(zhuǎn)染。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效果可以通過轉(zhuǎn)染表達EGFP等熒光蛋白的質(zhì)粒進行快速鑒定。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑與Lipofectamine® 3000 Reagent轉(zhuǎn)染效果比較請參考下圖:
圖1. 碧云天生產(chǎn)的Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑與Thermo公司的Lipofectamine® 3000轉(zhuǎn)染試劑和Promega公司的ViaFect™轉(zhuǎn)染試劑用EGFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染圖中所示細胞時的轉(zhuǎn)染效率比較。僅轉(zhuǎn)染試劑不同,其余條件一致。圖中數(shù)據(jù)僅供參考,實測效果可能會因為所使用細胞的實際株系、代數(shù)、培養(yǎng)條件等的不同而有所不同。
圖2. Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑(A, B)、Lipofectamine® 3000轉(zhuǎn)染試劑(C, D)和ViaFect™轉(zhuǎn)染試劑(E, F)用EGFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染NIH3T3細胞后的實拍明場和熒光照片。
圖3. Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑(A, B)、Lipofectamine® 3000轉(zhuǎn)染試劑(C, D)和ViaFect™轉(zhuǎn)染試劑(E, F)用EGFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293T細胞后的實拍明場和熒光照片。
圖4. Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑(A, B)、Lipofectamine® 3000轉(zhuǎn)染試劑(C, D)和ViaFect™轉(zhuǎn)染試劑(E, F)用EGFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK293細胞后的
實拍明場和熒光照片。
圖5. Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑(A, B)、Lipofectamine® 3000轉(zhuǎn)染試劑(C, D)和ViaFect™轉(zhuǎn)染試劑(E, F)用EGFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Hela細胞后的實拍明場和熒光照片。
圖6. Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑(A, B)、Lipofectamine® 3000轉(zhuǎn)染試劑(C, D)和ViaFect™轉(zhuǎn)染試劑(E, F)用EGFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HCT116細胞后的實拍明場和熒光照片。
圖7. Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑(A, B)、Lipofectamine® 3000轉(zhuǎn)染試劑(C, D)和ViaFect™轉(zhuǎn)染試劑(E, F)用EGFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HepG2細胞后的實拍明場和熒光照片。
圖8. Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑(A, B)、Lipofectamine® 3000轉(zhuǎn)染試劑(C, D)和ViaFect™轉(zhuǎn)染試劑(E, F)用EGFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染A549細胞后的實拍明場和熒光照片。
每毫升本轉(zhuǎn)染試劑大約可以轉(zhuǎn)染10厘米培養(yǎng)皿40個、6厘米培養(yǎng)皿125個、6孔板250個孔、12孔板625個孔、24孔板1250個孔、48孔板2500個孔、96孔板6250個孔。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
C0533-0.5ml | Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑 | 0.5ml |
C0533-1.5ml | Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑 | 1.5ml |
C0533-7.5ml | Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑 | 5×1.5ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
4℃保存。長期不使用可以-20℃保存。
注意事項:
加大Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑用量容易導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率顯著下降,請優(yōu)先按照推薦的轉(zhuǎn)染試劑用量進行轉(zhuǎn)染。如有必要再調(diào)整用量。
使用高純度的DNA或RNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。對于質(zhì)粒,可以使用碧云天生產(chǎn)的質(zhì)粒大量抽提試劑盒(D0026)進行抽提,以保證可以獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。
轉(zhuǎn)染前細胞必須處于良好的生長狀態(tài)。
經(jīng)測試即使在使用本產(chǎn)品轉(zhuǎn)染后4-6小時更換細胞培養(yǎng)液,也不會對轉(zhuǎn)染效率產(chǎn)生顯著影響。如有必要,wan quan可以在轉(zhuǎn)染后4-6小時更換細胞培養(yǎng)液。
需自備不含抗生素的無血清培養(yǎng)液、Opti-MEM®培養(yǎng)液或普通的DMEM培養(yǎng)液。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑不能vortex或離心,宜緩慢晃動混勻。
Lipo8000™轉(zhuǎn)染試劑使用后請立即蓋好蓋子,避免長時間暴露在空氣中,影響轉(zhuǎn)染效率。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。