PEI聚乙烯亞胺線性轉染試劑作為一種陽離子聚合物非病毒基因載體,在線性轉染試劑的領域中扮演著比較重要的角色。其特殊的化學結構使其成為科研工作中不可少的材料之一。
PEI是由單體(-CH2-CH2-NH-)構成,具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團的水溶性聚合物。其結構中,每3個原子就有1個氮原子,形成了豐富的胺基,這使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的質子海綿體。這一特性使得PEI具有較強的結合DNA的能力,以及黏附細胞并作為基因轉導載體的能力。
PEI能夠將DNA縮合成帶正電荷的微粒,這些微粒可以黏合到帶有負電荷的細胞表面殘基上,并通過胞吞作用進入細胞。這一過程是PEI進行基因轉染的基礎,也是其得以廣泛應用的關鍵所在。在生理pH下,PEI的氨基團近半數被質子化,而另外一半則處于未質子化狀態(tài)。這種結構特性不僅使PEI具有較好的水溶性,還意味著其在不同pH條件下都能有效結合核酸,并實現(xiàn)高效的轉染效率。
PEI25K由于含有4-11%的殘留丙?;@可能阻礙聚合物主鏈與DNA的有效結合,因此批間轉染效率可能會有比較大的差異。為了確保實驗的一致性和可重復性,建議當采購PEI25K時,一個批次可以多購買一些存儲。值得注意的是,盡管有效期標注只有18個月左右,但在室溫干燥避光的條件下,PEI25K的穩(wěn)定性實際上可以保持10年以上。
PEI聚乙烯亞胺線性轉染試劑具有細胞毒性低,轉染效率高的特點。特別是在HEK293和CHO等細胞中,基因表達效率較高。線性PEI轉染試劑廣泛適用于多種細胞系,包括但不限于HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和Hela細胞等。
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