產(chǎn)品名稱:瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒
產(chǎn)品貨號:TD407- 10 (10 次反應)
TD407-50 (50 次反應)
TD407-200 (200 次反應)
產(chǎn)品亮點:
• 從瓊脂糖凝膠中快速(15分鐘)高產(chǎn)量地回收超純的DNA.
• 微量柱設計使得DNA可以在高濃度下洗脫到最小體積(≥10 µl).
• 洗脫的DNA非常適合用于DNA連接、測序、標記、PCR等應用。
產(chǎn)品組分:
產(chǎn)品特性:
DNA純度-洗脫到的高質(zhì)量、純化的 DNA 尤其適用于 DNA 測序, DNA 連接, 內(nèi)切酶消化,基因芯片;
DNA大小-50 bp 到 23 kb 之間;
DNA回收率-一般的,可在 10 µl 的水中洗脫出 5 µg 的 DNA 。對于從 50bp 到10kb 的DNA,回收率為 70%-90% ,對于從 11kb 到 23kb 的 DNA ,回收率為 50-70%;
樣品來源-來自 PCR, 限制性內(nèi)切酶消化, 質(zhì)粒抽提, 激酶反應,等的DNA和在TAE 或TBE緩沖的瓊脂糖凝膠切片中的 DNA。
緩沖液制備:
DNA在使用之前一定要配好,添加好乙醇后在試劑瓶上做好標記?。。?/span>
10次反應的DNA洗滌液應按照標簽上的提示添加100%的乙醇;
50次反應的DNA應添加24ml 100%的乙醇(26 ml 95%的乙醇)到6ml的DNA中;
100次反應的DNA應添加48ml 100%的乙醇(52 ml 95%的乙醇)到12ml的DNA中;
200次反應的DNA應添加96ml 100%的乙醇(104 ml 95%的乙醇)到24ml的DNA中。
實驗流程:
以下離心操作步驟的離心力均在 10,000 - 16,000 x g 之間進行。
1. 使用刀片或手術(shù)刀把 DNA 片段從瓊脂糖凝膠上切除下來并且移置到 1.5 ml 小型離心管內(nèi). 注意: 從凝膠上切下的瓊脂糖盡可能的要少.
2. 將 3 倍體積的ADB溶膠液 添加到每 1 體積從凝膠上切下的瓊脂糖切塊中. 例如: 對于 100 µl (mg) 的瓊脂糖凝膠切塊 , 添 加 300 µl 的 ADB 緩沖液 .
3. 在 37-55 ℃下溫水浴 10 分鐘直到凝膠切塊溶解. 注意: 確定凝膠切塊解是很重要的步驟. 在溫水浴過程中可輔以溫和的攪拌有助于凝膠的溶解。如果DNA 大小超過 8kb ,加熱之后需要額外添加等量膠塊體積的水。例如: 100 µl (mg) 的瓊脂糖凝膠切塊,添加 300 µl 的 ADB 緩沖液.加熱之后添加 100µl 的水。
4. 將溶解的瓊脂糖切塊溶液放到 1號C 中并把柱套在收集管里.
5. 離心 1 分鐘后. 倒掉過濾液. 注意: 柱所能容納的樣品體積為 800 µl. 所以, 如果樣品體積超過 800 µl 時, 柱就要被多次填充和離心。
6. 添加 200µl 的 DNA洗滌液 到柱中離心 1 分鐘, 去除濾出液.
7. 重復第 6 步洗滌步驟.
8. 可選步驟: 將收集管中的廢液倒掉,并將 1號C 套回 收集管 中額外離心2 分鐘,盡量除去洗滌液,以免洗滌液中殘留乙醇抑制下游反應。
8. 直接添加 10 µl DNA洗脫液 到柱基質(zhì)中. 將柱套在 1.5 ml 離心管中離心1 分鐘來洗脫DNA.
注意: 從柱中洗脫出的 DNA 產(chǎn)量與 pH 和溫度有關(guān). 如果使用水來洗脫, 確保 pH 是 >6.0. 在向柱中加入水后靜置 1 分鐘可增加較大 (> 6 kb) DNA 的產(chǎn)量.在 60-70 oC 的水中洗脫 DNA 可增加較大DNA (> 10 kb)的產(chǎn)量。
注意: 如果試驗需要的話 TE 緩沖液 (10mMTris-HCl , 1mM EDTA , pH8.0) 或改進的 TE(10mM Tris-HCl , 0.1mMEDTA , pH8.5) 也可用來洗脫.
得到的超純 DNA 可進行后續(xù)試驗了!
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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
TD407- 10 | 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 | 10次 |
TD407- 50 | 50次 | |
TD407- 200 | 200次 |
天津益元利康生物科技有限公司現(xiàn)貨供應簡石生物瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒(TD407),歡迎選購!
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