產(chǎn)品名稱:Elabscience人成纖維細胞生長因子FGF21 ELISA試劑盒(E-EL-H0074)現(xiàn)貨供應
產(chǎn)品貨號:E-EL-H0074
產(chǎn)品品牌:Elabscience
產(chǎn)品用途:該試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿或其它相關生物液體中FGF21濃度。
檢測原理:本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法。用抗人 FGF21 抗體包被于酶標板上,實驗時樣品(或標準品)中的人 FGF21 會與包被抗體結(jié)合。后依次加入生物素化的抗人 FGF21 抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素,抗人 FGF21 抗體與結(jié)合在包被抗體上的人 FGF21 結(jié)合,生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB 在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在 450 nm 波長處測 OD 值,FGF21 濃度與 OD450 值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中 FGF21 的濃度。
注意事項:
試劑盒注意事項:
1) 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷。
2) 試驗中請穿著實驗服并戴乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液樣品時,請按國家生物試驗室安全防護條例執(zhí)行。
3) 剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。暫時不用的板條應拆卸后放入備用鋁箔袋,按照上述表格中保存條件存放。
4) 請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素化抗體工作液、酶結(jié)合物工作液。未用完的濃縮生物素化抗體(100×)、濃縮HRP酶結(jié)合物(100×)、酶標板及其他原液按照上述表格中保存條件存放。
5) 檢測使用的酶標儀需要安裝能檢測450±2 nm波長的濾光片,光密度范圍在0-3.5之間。建議使用時提前15分鐘預熱。
6) 請勿使用其他批號或其他來源的試劑混合或替代本試劑盒中的試劑。
7) 試驗中所用的EP管和吸頭均為一次性使用,嚴禁混用。
8) 請勿使用過期的試劑。n
樣品注意事項:
1) 收集血液的試管應為一次性無內(nèi)毒素試管。避免使用溶血,高血脂樣品。
2) 樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測可保存于2-8℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),或-80℃(3個月內(nèi)檢測),避免反復凍融。在檢測前,冷凍過的樣本應緩慢地融化并離心除去凍融過程產(chǎn)生的沉淀物。室溫混勻后使用。
3) 試劑盒檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍。如果樣品中待測物濃度過高或過低,請對樣本做適當?shù)南♂尰驖饪s。
4) 若所檢樣本不在說明書所列樣本之中,建議做預實驗驗證其檢測有效性。
5) 若使用化學裂解液制備組織勻漿或細胞提取液,由于引入某些化學物質(zhì)會導致ELISA測值出現(xiàn)偏差。
6) 某些重組蛋白可能與試劑盒中捕獲或檢測抗體不匹配而出現(xiàn)不能檢測的情況。
操作步驟:
1. 分別設定標準孔、空白孔和樣本孔。標準孔加入 100 μL倍比稀釋的標準品,空白孔加入 100 μL 標準品&樣本稀釋液,其余孔加入 100 μL 待測樣本(建議所有的待檢樣本和標準品在檢測中設立復孔;建議通過預實驗或咨詢技術支持確定待檢樣本的稀釋倍數(shù))。給酶標板覆膜,37℃孵育 90 分鐘。提示:加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,避免產(chǎn)生氣泡。加樣時間宜控制在 10 分鐘內(nèi)。
2. 甩盡孔內(nèi)液體,不用洗滌。每個孔中加入生物素化抗體工作液 100 μL,酶標板加上覆膜,37℃溫育 1 小時。
3. 甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干。每孔加洗滌液 350 μL,浸泡 1 分鐘,吸去或甩掉酶標板內(nèi)的液體,拍干。重復此洗板步驟 3 次。提示:此處與其他洗板步驟都可使用洗板機(參考北京拓普 DEM-3 型洗板機參數(shù)設置:2 點吸,每孔加入洗滌液 350 μL,振板 5 秒,吸液 0.5 秒)。洗板完成后請立即進行下步操作,不要讓微孔板干燥。
4. 每孔加 HRP 酶結(jié)合物工作液 100 μL,酶標板加上覆膜,37℃溫育 30 分鐘。
5. 甩盡孔內(nèi)液體,洗板 5 次,方法同步驟 3。
6. 每孔加底物溶液(TMB)90 μL,酶標板加上覆膜,37℃避光孵育 15 分鐘左右。提示:根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過 30 分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時(前 4 個顯色孔出現(xiàn)明顯藍色梯度),即可終止。提前 15 分鐘打開酶標儀預熱。
7. 每孔加終止液 50 μL,終止反應。提示:終止液的加入順序應盡量與底物溶液的加入順序相同。
8. 立即用酶標儀在 450 nm 波長測量各孔的光密度(OD值)。
歡迎訂購:
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
E-EL-H0074 | 人成纖維細胞生長因子FGF21 ELISA試劑盒 | 96T |
48T | ||
96T×5 |
天津益元利康生物科技有限公司現(xiàn)貨供應Elabscience人成纖維細胞生長因子FGF21 ELISA試劑盒(E-EL-H0074),歡迎選購!
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