細(xì)胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基的顏色變化往往對應(yīng)著細(xì)胞狀態(tài)。大多數(shù)情況下,1640培養(yǎng)基都呈紅色,這是因為細(xì)胞培養(yǎng)基的PH值大多在7.4左右,添加了酚紅的培養(yǎng)基的顏色就是紅色。那么你知道1640培養(yǎng)基為什么會變色嗎?讓我們一起來看看吧!
不同成分培養(yǎng)基的顏色會有差異,例如DMEM會比1640顏色深一點(diǎn),主要是DMEM里面的酚紅含量比1640多導(dǎo)致。當(dāng)然還有部分培養(yǎng)基不含有酚紅,呈現(xiàn)的就是無色或者淡黃色。
開封了一段時間后的1640培養(yǎng)基,顏色會比正常深很多。主要是因為培養(yǎng)基所用的緩沖體系為NaHCO3,培養(yǎng)基開封后NaHCO3會分解成CO2溢出,導(dǎo)致培養(yǎng)基偏堿;可以將培養(yǎng)瓶擰松放置于CO2培養(yǎng)箱中一段時間后,培養(yǎng)基顏色會變正常。
通常培養(yǎng)基里的酚紅指示劑遇酸會變黃,但也有可能是細(xì)胞被污染而導(dǎo)致的培養(yǎng)基顏色變黃,以下為幾種常見情況:
1. 由于細(xì)胞代謝產(chǎn)酸,培養(yǎng)了細(xì)胞后的培養(yǎng)基會從紅變黃,如果培養(yǎng)基是橘黃色,則是細(xì)胞健康生長的顏色,無須擔(dān)心,繼續(xù)培養(yǎng)即可。
2. 若細(xì)胞狀態(tài)良好,但換液后培養(yǎng)基顏色變黃快,則可能是因為細(xì)胞密度大或消耗過大,提示需要傳代了。
3. 若細(xì)胞狀態(tài)差,生長異常,培養(yǎng)基很快變黃,變渾濁,鏡下觀察有較多小顆粒物,則有可能是細(xì)菌污染或支原體污染。輕度污染可用抗生素清洗處理或使用支原體清除試劑,重度污染建議消殺后丟棄。
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