Ni-NTA Agarose 是一種親和層析基質(zhì)，用于純化帶有 His 標(biāo)簽的重組蛋白。His 標(biāo)簽中的組氨酸殘基憑借高特異性和親和力，與固定鎳離子配位球中的空位結(jié)合。澄清的細(xì)胞裂解物被加載到基質(zhì)上。His 標(biāo)簽蛋白與基質(zhì)結(jié)合，其他蛋白則穿過(guò)基質(zhì)。洗滌后，在非變性或變性條件下在緩沖液中洗脫 His 標(biāo)簽蛋白。
Ni-NTA Agarose 將 Ni-NTA 與 Sepharose CL-6B 支鏈耦合在一起，具有高結(jié)合能力，非特異性結(jié)合極少。這種材料具有出色的處理性能，適用于大多數(shù)規(guī)模的間歇式和柱式純化。Ni-NTA Agarose 既可單獨(dú)提供，也可作為 QIAexpress Kits 的組成部分提供，這些試劑盒是用于從大腸桿菌中高效表達(dá)和純化 His 標(biāo)簽蛋白的全套試劑盒。
QIAexpress Ni-NTA 蛋白純化系統(tǒng)基于的是獲得zhuan利的 Ni-NTA（次氮基三乙酸鎳）樹(shù)脂對(duì)含有六個(gè)或更多組氨酸殘基（連續(xù)或交替）的親和標(biāo)記（His 標(biāo)記）的蛋白的顯著選擇性。該技術(shù)可在非變性或變性條件下，從任何表達(dá)系統(tǒng)中一步純化幾乎所有 His 標(biāo)簽蛋白。NTA 有四個(gè)鎳離子螯合位點(diǎn)，與只有三個(gè)位點(diǎn)可與金屬離子相互作用的金屬螯合純化系統(tǒng)相比，NTA 與鎳的結(jié)合更緊密。額外的螯合位點(diǎn)可防止鎳離子浸出，與其他金屬螯合純化系統(tǒng)相比，它的結(jié)合能力更強(qiáng)，制備的蛋白純度更高。QIAexpress 系統(tǒng)可用于從任何表達(dá)系統(tǒng)中純化 His 標(biāo)簽蛋白，包括桿狀病毒、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、酵母和細(xì)菌。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：
1. 從粗裂解物中一步純化出純度大于 95% 的蛋白
2. 高結(jié)合親和力和高容量
3. 非變形或變性條件下的純化選擇
4. 預(yù)充即用型基質(zhì)，適用于任何規(guī)模的純化
5. 自動(dòng)純化和檢測(cè)方案
產(chǎn)品應(yīng)用：
1. Ni-NTA 基質(zhì)能可靠地一步純化適用于以下任何應(yīng)用的 His 標(biāo)簽蛋白
2. 結(jié)構(gòu)和功能研究
3. 結(jié)晶以確定三維結(jié)構(gòu)
4. 蛋白間和蛋白與 DNA 之間相互作用檢測(cè)
5. 通過(guò)免疫接種產(chǎn)生抗體
6. 將純化規(guī)模擴(kuò)大到生產(chǎn)規(guī)模
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