黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

    1. <dd id="lgp98"></dd>
      • <dd id="lgp98"></dd>
        1. 您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

          | 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

          13011300176

          technology

          首頁   >>   技術(shù)文章   >>   Aldehyde-activated SepFast系列產(chǎn)品說明書

          天津益元利康生物科技有限...

          立即詢價

          您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

          Aldehyde-activated SepFast系列產(chǎn)品說明書

          閱讀:702      發(fā)布時間:2023-4-10
          分享:

          活化瓊脂糖基質(zhì)在制備和使用定制親和層析介質(zhì)方面具有良好的記錄。將生物特異性配體與醛活化瓊脂糖偶聯(lián)是一成功且有據(jù)可查的技術(shù)。

          Aldehyde-activated SepFast通過還原胺化反應與含有伯胺基團的配體形成化學穩(wěn)定的仲胺鍵。這種預活化的瓊脂糖基質(zhì)可用于親和層析介質(zhì)的定制,適用于小規(guī)模和大規(guī)模純化應用。

          醛基.png

           

          1. 屬性

          2種基質(zhì)可供選擇,適合各種待偶聯(lián)或純化的分子。

          • Aldehyde-activated SepFast 4 High Flow (4HF) 由高度交聯(lián)的4%珠狀瓊脂糖組成。其大孔徑適用于偶聯(lián)或純化大分子。它具有高機械剛度,可在降低背壓的情況下實現(xiàn)高流量。

          • Aldehyde-activated SepFast 6 High Flow (6HF) 由高度交聯(lián)的6%珠狀瓊脂糖組成。其適中的孔徑適用于偶聯(lián)較小的分子。它也具有高機械剛度,可在降低背壓的情況下實現(xiàn)高流量。

          由于瓊脂糖具有出色的親水性和低非特異性結(jié)合特性,長期以來一直用于色譜分離。這些顆粒具有開孔結(jié)構(gòu),對各種分子具有出色的傳質(zhì)性能。基質(zhì)通過氧化被激活以產(chǎn)生醛基,它直接與分子中的伯胺基反應,在還原劑存在的情況下被固定化。

          Aldehyde-activated SepFast20%乙醇中的水懸浮液形式提供。

          1  Aldehyde-activated SepFast 4HF/6HF的特性

          可耦聯(lián)基團

          -NH2

          基質(zhì)

          SepFast 4HF:高度交聯(lián)的4%瓊脂糖

          SepFast 6HF:高度交聯(lián)的6%瓊脂糖

          粒徑

          50-150 μm

          活化水平

          > 5 μmol aldehyde /ml medium

          pH穩(wěn)定性

          3-13(具有配體依賴性)

          化學穩(wěn)定性

          偶聯(lián)配體能夠接受的所有常用的水性化學品穩(wěn)定

          保存

          4-8

          2. 配體固定化

          以下是一般的配體偶聯(lián)程序。

          2.1  將目標配體溶解在偶聯(lián)緩沖液中,0.1 M磷酸鈉pH 7.0。一般對于蛋白質(zhì)配體,凝膠的制備濃度為5 - 20 mg/ml。對于配體,凝膠的制備濃度為10 - 100  µmol/ml。偶聯(lián)緩沖液的體積可以固定凝膠體積一半或相同。

          2.2  在過濾裝置中用至少倍體積的偶聯(lián)緩沖液清洗醛活化凝膠。

          2.3  將洗凈并吸干的凝膠(來自步驟  2.2)轉(zhuǎn)移到步驟  2.1 制備的溶液中。

          如果發(fā)生變化,請調(diào)整 pH 值。

          2.4  將漿液在通風良好的通風櫥中在室溫下混合 2?4 小時。

          2.5  將氰基硼QING化鈉(0.5 g/100 ml  活性凝膠)加入漿液中,過夜。注意:氰基硼QING化鈉有毒,應格外小心處理。

          2.6  用至少 5 倍凝膠體積的偶聯(lián)緩沖液清洗凝膠。

          2.7 在氰基硼QING化鈉存在下,將凝膠重新懸浮到相同體積的封閉溶液,0.1 M Tris/HCl,pH 8.01 M乙醇胺pH 8.02-3小時。

          2.8 5倍體積的0.1 M Tris/HCl + 1 M NaCl,pH 8.0 洗滌凝膠,然后用5倍體積的0.1 M醋酸鹽緩沖液 + 1 M NaClpH 4.0洗滌凝膠。

          2.9 使用前用工作/平衡緩沖液清洗凝膠。

          3. 固定化效率的一般考慮

          3.1 pH

          還原胺化可以pH 4 - 10之間非常有效地進行。但是可以優(yōu)化偶聯(lián)pH以獲得最佳結(jié)果(例如,高偶聯(lián)產(chǎn)率和高配體活性)。

          在配體溶解后要注意調(diào)整偶聯(lián) pH 值。

          3.2 偶聯(lián)方案

          應避免使用含有氨基的溶液。

          可以引入稀釋的某些有機溶劑以提高配體的溶解度。應事先測試此類溶劑的適用性。

          耦合溶液的體積與活化凝膠的體積保持一致。建議使用0.5-1 : 1 v/v的理想比例。

          3.3

          偶聯(lián)緩沖液中鹽的存在(例如0.5  M 或飽和)可以提固定效率。

          3.4 基礎(chǔ)基質(zhì)中的活化基團

          對于某些配體或應用,基礎(chǔ)基質(zhì)中的活化水平可能過,偶聯(lián)配體的活性可能會降低。

          在降低的 pH 值下偶聯(lián)可能會減少配體分子的連接點。它可以提偶聯(lián)配體的活性。活化基團的受控封閉,例如在添加配體前幾個小時用  5?10  mM  封閉緩沖液孵育凝膠,也可以減少過度偶聯(lián)問題。

          3.5 反應時間

          可以優(yōu)化偶聯(lián)過程中配體和活化介質(zhì)之間的接觸時間以保持配體的生物活性。

          3.6 還原劑的選擇

          其他還原劑如硼QING化鈉可用于偶聯(lián)反應。氰基硼氫化物是一種較溫和的還原劑,它只還原醛基和伯胺基之間形成的中間席夫堿,得到穩(wěn)定的仲胺鍵。硼氫化物是一種更強的還原劑,可還原席夫堿和未偶聯(lián)的醛基。

          3.7 屏蔽剩余的活化配體

          未與配體反應的活化基團應通過添加含有pH 8 - 9伯胺的額外小分子(例如 Tris 或乙醇胺)來封端。

          3.8 最終介質(zhì)的洗滌

          偶聯(lián)反應后需要將未連接或弱連接的配體WAN全洗掉。采用高pH值和低pH值交替的洗滌方法可以確保有效去除不需要的物質(zhì)。

          4. 固定化親和介質(zhì)的使用

          配體偶聯(lián)介質(zhì)可用于使用間歇攪拌罐模式或填充柱模式的純化。處理這種材料遵循與處理其他基于瓊脂糖基質(zhì)相同的原則。

          5. 儲存

          Aldehyde-activated SepFast應在8℃下儲存。偶聯(lián)的濕介質(zhì)應在防菌劑(例如20%乙醇)存在的情況下于4-8℃儲存。切勿凍存耦合介質(zhì)。

          6. 更多信息

          了解更多關(guān)于BioToolomics產(chǎn)品聯(lián)系天津益元利康科技有限公司了解產(chǎn)品信息。 

          7. 訂購信息

          產(chǎn)品

          規(guī)格

          貨號

          Aldehyde-activated

          SepFast 4HF

          5 mL

          340101-5ML

          50 mL

          340101-50ML

          1 L

          340101-1L

          Aldehyde-activated

          SepFast 6HF

          5 mL

          340104-5ML

          50 mL

          340104-50ML

          1 L

          340104-1L


          會員登錄

          請輸入賬號

          請輸入密碼

          =

          請輸驗證碼

          收藏該商鋪

          標簽:
          保存成功

          (空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

          常用:

          提示

          您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
          在線留言
          招远市| 德惠市| 神池县| 宁安市| 兰坪| 南召县| 津南区| 瑞安市| 循化| 濮阳县| 汝南县| 噶尔县| 台南县| 湘潭县| 阿瓦提县| 高唐县| 东方市| 巧家县| 遵化市| 贵南县| 苍溪县| 东阿县| 静乐县| 视频| 莱西市| 普定县| 阿拉善右旗| 图片| 霍山县| 海安县| 浠水县| 兴安县| 瑞丽市| 昌宁县| 广州市| 兰溪市| 晴隆县| 麟游县| 固镇县| 原阳县| 当雄县|