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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | YLK10413P | 應用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研實驗 | 保存條件 | 低溫運輸,-20℃保存 |
有效期 | 12個月 | 試劑盒說明 | 不同批號的試劑盒組分不可交互使用 |
豬腦心肌炎病毒RT-PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品名稱:豬腦心肌炎病毒RT-PCR檢測試劑盒
腦心肌炎病毒(Encephalomyocarditis Virus,EMCV)在分類上屬小 RNA 病毒科,心肌病毒屬,是一種無囊膜的單股正鏈 RNA 病毒。由 EMCV 引起的豬腦心肌炎是豬的一種以腦炎、心肌炎或心肌周圍炎為主要特征的急性傳 染病,給養(yǎng)豬業(yè)造成了極大的經(jīng)濟損失。本產(chǎn)品適用于檢測豬血清、腦、心肌以及 淋巴結(jié)等組織標本或病毒培養(yǎng)液中 EMCV 的 mRNA,適用于 EMCV 感染的輔助診斷。它具有下列特點:
1. 用于 EMCV 的定性鑒定檢測和分子流行病學調(diào)查。
2. 能對樣品中 EMCV 進行快速檢測,具有良好的特異性和敏感性。
3. 使用一管式 RT-PCR 試劑盒,減少了操作步驟,降低了操作誤差。
【試劑組成】
成分 | 50 次熱封袋包裝 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer,2× | 750 μL |
MMLV-Taq Mix | 100 μL |
EMCV 專一性引物對 | 200 μL |
EMCV 陽性對照 | 50 μL |
超純水 | 1 mL |
使用手冊 | 1 份 |
【運輸及保存】
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
【自備試劑】一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
【注意事項】
一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化 EMCV 樣品的 RNA ,也可以另購本公司的一管式病毒RANout 或柱式病毒 RNAout,上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對 照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最 好在專門的區(qū)域操作。
三、設(shè)置 RT-PCR 反應(30 uL 體系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 | 樣品 | 陽性對照 | 陰性對照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer,2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無 | 無 |
EMCV 陽性對照 | 無 | 2 uL | 無 |
補超純水到 | 28 uL | 28 uL | 28 uL |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
4. 輕柔混勻后上機,按下面參數(shù)進行 RT-PCR。
過程 | 溫度 | 時間 |
逆轉(zhuǎn)錄 | 60℃ | 30 分鐘 |
預變性 | 94℃ | 5 分鐘 |
PCR 反應
(30 個循環(huán)) | 94℃ | 30 s |
55℃ | 30 s | |
72℃ | 30 s | |
延伸 | 72℃ | 5 分鐘 |
5.電泳檢測 RT-PCR 產(chǎn)物。預期的PCR 產(chǎn)物長度為 286 bp。