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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研試劑盒>>ELISA試劑盒>> 人檸檬酸水解酶(ACL)ELISA試劑盒

          人檸檬酸水解酶(ACL)ELISA試劑盒
          • 人檸檬酸水解酶(ACL)ELISA試劑盒
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號(hào)
          • 廠(chǎng)商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時(shí)間:2024-07-18 10:42:38瀏覽次數(shù):305評(píng)價(jià)

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 96T/48T
          貨號(hào) YLK-5697E 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研實(shí)驗(yàn) 樣本 血清、血漿及相關(guān)液體樣本
          適用物種 人、大鼠、小鼠、植物、動(dòng)物等 檢測(cè)方法 雙抗體夾心法
          保存條件 2-8℃ 有效期 6個(gè)月
          人檸檬酸水解酶(ACL)ELISA試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中檸檬酸水解酶(ACL)表達(dá)。

          人檸檬酸水解酶(ACL)ELISA試劑盒

                                                                     (ELISA) 使用說(shuō)明書(shū)

          ?人檸檬酸水解酶(ACL)ELISA試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中檸檬酸水解酶(ACL)表達(dá)。

          實(shí)驗(yàn)原理

          本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人檸檬酸水解酶(ACL)水平。用純化的人檸檬酸水解酶(ACL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入檸檬酸水解酶(ACL),再與 HRP 標(biāo)記的檸檬酸水解酶(ACL)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹di洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的檸檬酸水解酶(ACL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人檸檬酸水解酶(ACL) 濃度。


          試劑盒組成

          1

          30倍濃縮洗滌液

          20ml×1

          7

          終止液

          6ml×1

          2

          酶標(biāo)試劑

          6ml×1

          8

          標(biāo)準(zhǔn)品(400pg/ml

          0.5ml×1

          3

          酶標(biāo)包被板

          12孔×8

          9

          標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          1.5ml×1

          4

          樣品稀釋液

          6ml×1

          10

          說(shuō)明書(shū)

          1

          5

          顯色劑A

          6ml×1

          11

          封板膜

          2  

          6

          顯色劑B

          6ml×1/

          12

          密封袋

          1個(gè)

          標(biāo)本要求

          1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

          2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。


          操作步驟

          1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

          120pg/ml

          5   號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

          150µl   的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          60pg/ml

          4   號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

          150µl   5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          30pg/ml

          3   號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

          150µl   4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          15pg/ml

          2   號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

          150µl   3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          7.5pg/ml

          1   號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

          150µl   2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液



          2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

          3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

          4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

          5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

          6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

          7.溫育:操作同3。

          8.洗滌:操作同5。

          9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

          10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

          11.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

          計(jì)算

          以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

          注意事項(xiàng)

          1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

          2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

          3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

          4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

          5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

          6.底物請(qǐng)避光保存。

          7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

          8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

          9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

          保存條件及有效期

          1.試劑盒保存:2-8℃。

          2.有效期:6個(gè)月

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