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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研試劑盒>>ELISA試劑盒>> 人過氧化氫(H2O2)ELISA試劑盒

          人過氧化氫(H2O2)ELISA試劑盒
          • 人過氧化氫(H2O2)ELISA試劑盒
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時(shí)間:2024-07-18 09:55:24瀏覽次數(shù):308評價(jià)

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 96T/48T
          貨號 YLK-5676E 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研實(shí)驗(yàn) 樣本 血清、血漿及相關(guān)液體樣本
          適用物種 人、大鼠、小鼠、植物、動物等 檢測方法 雙抗體夾心法
          保存條件 2-8℃ 有效期 6個(gè)月
          人過氧化氫(H2O2)ELISA試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中過氧化氫(H2O2)表達(dá)。

          人過氧化氫(H2O2)ELISA試劑盒

                                                                     (ELISA) 使用說明書

          ?人過氧化氫(H2O2)ELISA試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中過氧化氫(H2O2)表達(dá)。

          實(shí)驗(yàn)原理

          本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人過氧化氫(H2O2)水平。用純化的人過氧化氫(H2O2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入過氧化氫(H2O2),再與HRP標(biāo)記的過氧化氫(H2O2)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹di洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化氫(H2O2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人過氧化氫(H2O2)濃度。


          試劑盒組成

          1

          30倍濃縮洗滌液

          20ml×1

          7

          終止液

          6ml×1

          2

          酶標(biāo)試劑

          6ml×1

          8

          標(biāo)準(zhǔn)品(400pg/ml

          0.5ml×1

          3

          酶標(biāo)包被板

          12孔×8

          9

          標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          1.5ml×1

          4

          樣品稀釋液

          6ml×1

          10

          說明書

          1

          5

          顯色劑A

          6ml×1

          11

          封板膜

          2  

          6

          顯色劑B

          6ml×1/

          12

          密封袋

          1個(gè)

          標(biāo)本要求

          1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

          2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


          操作步驟

          1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

          40pg/ml

          5號標(biāo)準(zhǔn)品

          150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          20pg/ml

          4號標(biāo)準(zhǔn)品

          150μl5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          10pg/ml

          3號標(biāo)準(zhǔn)品

          150μl4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          5pg/ml

          2號標(biāo)準(zhǔn)品

          150μl3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

          2.5pg/ml

          1號標(biāo)準(zhǔn)品

          150μl2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液







          2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

          3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

          4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

          5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

          6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

          7.溫育:操作同3。

          8.洗滌:操作同5。

          9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

          10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

          11.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

          計(jì)算

          以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

          注意事項(xiàng)

          1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

          2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

          3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

          4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

          5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

          6.底物請避光保存。

          7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

          8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

          9.本試劑不同批號組分不得混用。

          保存條件及有效期

          1.試劑盒保存:2-8℃。

          2.有效期:6個(gè)月

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