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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復蘇/凍存大鼠肺小動脈平滑肌細胞

          大鼠肺小動脈平滑肌細胞
          • 大鼠肺小動脈平滑肌細胞
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號 復蘇/凍存
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時間:2024-07-10 19:31:07瀏覽次數(shù):286評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號 YLK-XB1276h 應用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研 組織來源 肺小動脈組織
          大鼠肺小動脈平滑肌細胞分離自肺小動脈組織;小動脈(sm allartery), 管 徑 在 0.3~ 1mm 之間,小動脈包括粗細不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)"。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。

          大鼠肺小動脈平滑肌細胞

          產(chǎn)品名稱 :大鼠肺小動脈平滑肌細胞

          產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1276h

          組織來源 :肺小動脈組織

          產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


          細胞簡介:

          肺小動脈平滑肌細胞分離自肺小動脈組織;小動脈(sm allartery), 管 徑 在 0.3~ 1mm 之間,小動脈包括粗細不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)"。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。

          中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當平滑肌在神經(jīng)支配下強力收縮時,其管腔可以wan全閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細血管內(nèi),從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,可使血壓顯著上升。反之,當小動脈的平滑肌舒張時,則可使大量的血液流入毛細血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。終末小動脈(terminalarteri-ole)的口徑為20~30μm ;后小動脈(m etar-te riole),又稱毛細血管前小動脈(p recapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm 。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,在毛細血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細血管前括約肌(p recapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調(diào)節(jié)真毛細血管的血流量,是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)"。


          質(zhì)量檢測

          優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          培 養(yǎng)  基 :  含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :  每2-3天換液一次
          生長特性 :  貼壁 細胞形態(tài) 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳2-3代 傳代比例 1:2
          消 化  液 :  0.25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%

          該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


          客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

          1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細胞消化
          1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細胞收貨脫落
          1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
          5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
          4. 細胞實驗

          因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


          注意事項

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

          2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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