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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復蘇/凍存大鼠骨外膜細胞

          大鼠骨外膜細胞
          • 大鼠骨外膜細胞
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號 復蘇/凍存
          • 廠商性質 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時間:2024-07-10 18:01:15瀏覽次數(shù):236評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號 YLK-XB1232h 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研 組織來源 骨組織
          大鼠骨外膜細胞分離自骨外膜組織;骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質外面包著的那層膜;在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細胞,稱為成骨細胞,這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞,稱為破骨細胞。

          大鼠骨外膜細胞

          產(chǎn)品名稱 :大鼠骨外膜細胞

          產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1232h

          組織來源 :骨組織

          產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


          細胞簡介:

          骨外膜細胞分離自骨外膜組織;骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質外面包著的那層膜;在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細胞,稱為成骨細胞,這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞,稱為破骨細胞。

          這兩種細胞作用相反又相互依據(jù)。成骨細胞像建筑工人,不停地生成新的骨組織,破骨細胞則像維修工人,不停地清除老化、死亡、破碎的骨結構,并且還負責拆除“違章建筑",就是除去不需要的多余的骨組織,從而使骨的整體結構更符合生物力學的需要。正常情況下,兩種細胞之間處于動態(tài)的平衡之中,完成骨的生長發(fā)育的新陳代謝。骨折之后,成骨細胞首先啟動,從而促使新骨痂的生成,即骨折的愈合。但是,股痂只是恢復了骨的連續(xù)性,往往不符合生物力學的需要,改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成。


          量檢測

          優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :  每2-3天換液一次
          生長特性 :  貼壁 細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
          傳代特性 :  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
          傳代比例 :  1:2
          消 化  液 :  0.25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%

          該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


          客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

          1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細胞消化
          1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細胞收貨脫落
          1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
          5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
          4. 細胞實驗

          因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


          注意事項

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

          2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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