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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復蘇/凍存大鼠卵泡膜細胞

          大鼠卵泡膜細胞
          • 大鼠卵泡膜細胞
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號 復蘇/凍存
          • 廠商性質 生產商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時間:2024-07-10 17:47:28瀏覽次數(shù):238評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號 YLK-XB1225h 應用領域 化工,生物產業(yè)
          主要用途 科研 組織來源 卵巢組織
          大鼠卵泡膜細胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發(fā)育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。

          大鼠卵泡膜細胞

          產品名稱 :大鼠卵泡膜細胞

          產品貨號 :YLK-XB1225h

          組織來源 :卵巢組織

          產品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


          細胞簡介:

          卵泡膜細胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發(fā)育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成;髓質位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。

          哺乳動物的卵巢內卵泡的發(fā)育需要相關激素的調節(jié)才能完成,垂體促性腺/激素(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開始發(fā)育,其過程中還產生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體促性腺/激素的作用下協(xié)同合成的,卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞,并轉變?yōu)榇萍に?。因此,卵泡膜細胞在生殖內分泌調節(jié)中占有關鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對于與性激素有關的婦產科疾病(如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中,卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結構的完整性,參與構成卵母細胞和顆粒細胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調節(jié)膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關報道,但是有關卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。


          細胞特性

          1) 組織來源于實驗動物的正常卵巢組織。

          2) 細胞鑒定:3β-羥基類固醇脫氫酶(3β-HSD)免疫熒光染色為陽性。

          3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

          4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

          5)細胞生長方式:梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。


          量檢測

          優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :  每2-3天換液一次
          生長特性 :  貼壁
          細胞形態(tài) :  成纖維細胞樣
          傳代特性 :  可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳
          傳代比例 :  1:2
          消 化  液 :  0.25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%

          該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


          客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

          1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細胞消化
          1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細胞收貨脫落
          1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
          5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
          4. 細胞實驗

          因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


          注意事項

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

          2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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