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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 復(fù)蘇/凍存大鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞

          大鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞
          • 大鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號 復(fù)蘇/凍存
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時間:2024-07-10 17:04:52瀏覽次數(shù):224評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號 YLK-XB1204h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研 組織來源 胎盤組織
          大鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞絨毛膜是構(gòu)成胎盤的胎鼠部分,占妊娠胎盤的主要部分。妊娠足月胎盤的絨毛滋養(yǎng)層主要由合體滋養(yǎng)細(xì)胞組成,細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞僅散在可見,滋養(yǎng)層的內(nèi)層為基底膜。
          滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖、功能調(diào)節(jié)失常與多種妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系;絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞是構(gòu)成胎盤屏障的主要組織結(jié)構(gòu),而胎盤是妊娠期間具有物質(zhì)交換與代謝,分泌激素和防御等功能的重要器官。

          大鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞

          產(chǎn)品名稱 :大鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞

          產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1204h

          組織來源 :胎盤組織

          產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


          細(xì)胞簡介:

          胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞分離自胎盤組織。胎盤(placenta) 是哺乳動物妊娠期間由 胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。

          絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸,外裹合體滋養(yǎng)層,稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸,使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織,并與胚體內(nèi)的血管相通時,次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤,而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。


          細(xì)胞特性

          1) 細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動物正常胎盤組織。

          2) 細(xì)胞鑒定:細(xì)胞角蛋白7 (CK7) 免疫熒光染色為陽性。

          3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

          4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

          5) 細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


          質(zhì)量檢測

          優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          包被條件 :PLL(0. 1m g/ml)
          培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :每2-3天換液一次
          生長特性 :貼壁
          細(xì)胞形態(tài) :梭形、多角形
          傳代特性 :可傳1-2代
          傳代比例 :1:2
          消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


          該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


          客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

          1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細(xì)胞消化
          1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細(xì)胞收貨脫落
          1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
          4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
          5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
          4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

          因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


          注意事項(xiàng)

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

          2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。


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