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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 復(fù)蘇/凍存大鼠腹膜間皮細(xì)胞

          大鼠腹膜間皮細(xì)胞
          • 大鼠腹膜間皮細(xì)胞
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號 復(fù)蘇/凍存
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時間:2024-07-10 16:19:07瀏覽次數(shù):248評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號 YLK-XB1182h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研 組織來源 腹膜組織
          大鼠腹膜間皮細(xì)胞分離自腹膜組織。腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細(xì)胞構(gòu)成,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。

          大鼠腹膜間皮細(xì)胞

          產(chǎn)品名稱 :大鼠腹膜間皮細(xì)胞

          產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1182h

          組織來源 :腹膜組織

          產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


          細(xì)胞簡介:

          腹膜間皮細(xì)胞分離自腹膜組織。腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細(xì)胞構(gòu)成,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連。腹膜也具有吸收撞擊保護內(nèi)臟的效果。腹膜(peritoneum ) 為全身面積最大、配布最復(fù)雜的漿膜,由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-p eritoneum ) 或腹壁薄層。覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visc eral-p eritoneum ) 腹膜或腹膜臟層。

          臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity) 。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細(xì)胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮,是覆蓋于腹膜表面的一層細(xì)胞。間皮細(xì)胞是構(gòu)成間皮的細(xì)胞,正常大小約為15-25微米,細(xì)胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑,使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護,不會互相磨損受傷。而間皮所生產(chǎn)的潤滑和保護作用就是靠間皮細(xì)胞所分泌的物質(zhì)來達成,分泌物多半為細(xì)胞外基質(zhì)、玻尿酸類物質(zhì)。


          細(xì)胞特性

          1) 組織來源于實驗動物的正常腹膜組織。

          2) 細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)或角蛋白(Keratin)免疫熒光染色為陽性。

          3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

          4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

          5)細(xì)胞生長方式:三角形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


          質(zhì)量檢測

          優(yōu)利科生物實驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          包被條件 :PLL(0. 1m g/ml)
          培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :每2-3天換液一次
          生長特性 :貼壁
          細(xì)胞形態(tài) :成纖維細(xì)胞樣
          傳代特性 :可傳1-2代
          傳代比例 :1:2
          消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


          該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


          客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進行操作

          1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細(xì)胞消化
          1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細(xì)胞收貨脫落
          1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
          4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
          5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
          4. 細(xì)胞實驗

          因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


          注意事項

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

          2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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