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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 復(fù)蘇/凍存大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

          大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
          • 大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號(hào) 復(fù)蘇/凍存
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時(shí)間:2024-07-10 13:12:19瀏覽次數(shù):241評(píng)價(jià)

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號(hào) YLK-XB1090h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研 組織來(lái)源 腸組織
          大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞小腸位于腹中,上端接幽門(mén)與胃相通,下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連。小腸與心互為表里。是食物消化吸收的主要場(chǎng)所,盤(pán)曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門(mén),下接盲腸,全長(zhǎng)約5-6米,張開(kāi)有半個(gè)籃球大,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。

          大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

          產(chǎn)品名稱 :大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞

          產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB1090h

          組織來(lái)源 :腸組織

          產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


          細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸道組織。腸道指的是從胃幽門(mén)至肛men的消化管。腸是消化管中最長(zhǎng)的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)?,形成糞便,再通過(guò)直腸經(jīng)肛men排出體外。

          腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。微血管是極細(xì)微的血管,管徑平均為6-9μm ,連于動(dòng)、靜脈之間,互相連接成網(wǎng)狀。微血管壁薄,管徑較小,血流很慢,通透性大。其功能是利于血液與組織之間進(jìn)行物質(zhì)交換。其管壁主要由一層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成,在內(nèi)皮外面有一薄層結(jié)締組織。另外還??梢?jiàn)到一種扁而有突起的細(xì)胞貼在微血管的管壁外面,稱為周細(xì)胞。

          細(xì)胞特性

          1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常小腸組織。

          2) 細(xì)胞鑒定:vWF免疫熒光染色為陽(yáng)性。

          3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

          4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

          5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


          質(zhì)量檢測(cè)

          優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          包被條件 :PLL(0. 1m g/ml) ,明膠(0. 1%)
          培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :每2-3天換液一次
          生長(zhǎng)特性 :貼壁
          細(xì)胞形態(tài) :內(nèi)皮細(xì)胞樣
          傳代特性 :可傳2-3代
          傳代比例 :1:2
          消 化  液 :0. 25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%

          該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


          客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

          1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細(xì)胞消化
          1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細(xì)胞收貨脫落
          1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
          4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
          5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
          4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

          因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。


          注意事項(xiàng)

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

          2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。

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