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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復蘇/凍存兔肌源性干細胞

          兔肌源性干細胞
          • 兔肌源性干細胞
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號 復蘇/凍存
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時間:2024-07-10 10:41:12瀏覽次數(shù):190評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號 YLK-XB1014h 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研 組織來源 骨骼肌組織
          兔肌源性干細胞分離自肌肉組織。肌源性干細胞(M D SC s) 屬于成體多能干細胞,具有多細胞系分化和自我更新能力。通過誘導刺激,M D SC s可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細胞等多種細胞和組織類型。作為基因治療和組織工程的供體細胞,已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點。近年來,肌源性干細胞在治療尿失禁等方面的應用逐步得到重視。

          兔肌源性干細胞

          產(chǎn)品名稱 :兔肌源性干細胞

          產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1014h

          組織來源 :骨骼肌組織

          產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


          細胞簡介:

          肌源性干細胞分離自肌肉組織。肌源性干細胞(M D SC s) 屬于成體多能干細胞,具有多細胞系分化和自我更新能力。通過誘導刺激,M D SC s可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細胞等多種細胞和組織類型。作為基因治療和組織工程的供體細胞,已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點。近年來,肌源性干細胞在治療尿失禁等方面的應用逐步得到重視。需注意的是,肌源性干細胞主要存在于骨骼肌組織中,只是成熟組織的很少部分細胞。

          平時處于靜止狀態(tài),在細胞應激和組織缺失時才會激活。并且隨著年齡的增加,所含細胞數(shù)量逐漸減少,而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進行。肌源性干細胞的體外擴增對細胞移植和干細胞介導的基因治療至關重要。對肌源性干細胞的擴增研究發(fā)現(xiàn),EG F、FG F-2和SC F可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細胞進入有絲分裂周期,從而刺激細胞增生。更重要的是,細胞因子誘導的體外擴增可以通過自我更新不刺激細胞分化,從而保持干細胞表型。


          質(zhì)量檢測

          優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          包被條件 :PLL(0. 1m g/ml)
          培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :每2-3天換液一次
          生長特性 :貼壁
          細胞形態(tài) :成纖維細胞樣
          傳代特性 :可傳5代左右。3代以內(nèi)狀態(tài)
          傳代比例 :1:2
          消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


          該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


          客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

          1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細胞消化
          1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細胞收貨脫落
          1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
          5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
          4. 細胞實驗

          因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


          注意事項

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

          2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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